猪带绦虫dUTPase基因真核载体的构建及其在BHK细胞中的表达

• 作 者: 张艳 乔军 才学鹏 景志忠 骆学农 王笑笑
• 机 构: 甘肃农业大学动物医学院,中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室、甘肃省动物寄生虫病重点实验室
• 出 处: 动物医学进展
• 发表日期: 2007年6期
• 关键词: 猪带绦虫 六钩蚴 DUTPASE 重组质粒 转染 Taenia solium oncosphere dUTPase recombination plas
• 基金项目: 甘肃省生物技术研究与开发项目（GNSW-2003-27）

采用PCR技术从重组克隆载体pGEM-duTPase中扩增出猪带绦虫六钩蚴dUTPase基因，与表达载体pGFP—C1相连接，构建重组表达质粒pGFP—C1-dUTPase，转化大肠埃希菌DH5a，经测序证实，基因序列完全正确。用脂质体法转染BHK细胞，采用荧光显微镜实时观察和RT—PCR技术确定目的蛋白的表达情况。结果表明，在转染重组质粒48h后能观察到绿色荧光，表明在BHK细胞中成功地表达了猪带绦虫dUTPase与pGFP—C1的融合蛋白，为下一步重组dUTPase酶活性的研究奠定了基础。