【摘 要】
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目的 通过探讨NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)在小鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)肝组织中的表达,来初步判断NLRP3在HIRI过程中的作用.方法 纯系C57BL/6雄性小鼠共42只,7～8周龄,体重
【机 构】
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首都医科大学肝脏移植中心国家消化系统疾病临床医学研究中心首都医科大学附属北京友谊医院普外科 100050新乡医学院附属焦作市人民医院普外科 454000;首都医科大学附属北京潞河医院普外科 10110
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目的 通过探讨NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)在小鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)肝组织中的表达,来初步判断NLRP3在HIRI过程中的作用.方法 纯系C57BL/6雄性小鼠共42只,7～8周龄,体重为20 ～ 25 g,建立C57BL/6小鼠HIRI模型,采用完全随机化分组的方法将小鼠分为空白对照组,假手术组,2h、6h、12 h、24 h HIRI组及NLRP3抑制剂组(CY-09组),每组各6只.收集各组小鼠肝脏标本.各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平使用全自动生化分析仪检测;各组小鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-o(TNF-α)含量使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测;用苏木精-伊红染色及氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色病理学检测方法观察各组小鼠肝脏标本细胞凋亡情况;用Western blotting检测各组小鼠炎症因子NLRP3、凋亡蛋白-1(Caspase-1)表达水平.计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用单因素方差分析,如方差不齐则采用Dunnett C检验.结果 各HIRI组小鼠血清ALT、AST水平和血清IL-1β、IL-18、TNF-α含量显著高于空白对照组及假手术组(P＜0.05);各HIRI组的NLRP3和Caspase-1蛋白相对表达量显著增加.CY-09组小鼠血清ALT、AST水平和血清IL-1β、IL-18、TNF-α含量显著低于各HIRI组(P＜0.05);CY-09组肝脏组织苏木精-伊红染色坏死区域明显少于各HIRI组;TUNEL染色提示CY-09组小鼠肝细胞凋亡率显著低于12 h HIRI组(P＜0.05);CY-09组NLRP3蛋白相对表达量较各H1RI组小鼠显著下降,Caspase-1蛋白水平较各HIRI组显著下降.结论 HIRI可引起NLRP3表达增加,抑制NLRP3的表达后,HIRI的程度相对减轻.
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