猪生殖与呼吸综合征病毒ORF6片段的cDNA克隆及鉴定

• 作 者: 任慧英 李文立 杨汉春 孙月平
• 机 构: 莱阳农学院动物科学系,山东,莱阳,265200中国农业大学动物医学院,北京,100094
• 出 处: 城市道桥与防洪
• 发表日期: 2004年期
• 关键词: 猪生殖与呼吸综合征病毒 克隆 序列分析

根据已发表的PRRSV基因组序列,设计并合成了1对特异扩增ATCC VR-2332株的ORF6基因的引物.以ATCC VR-2332基因组为模板,通过RT-PCR扩增出586 bp的cDNA产物.将该cDNA片段经T-A连接插入pGEM-Teasy载体中,用重组质粒转化大肠埃希氏菌JM109,获得重组质粒转化菌.对重组质粒DNA进行PCR及酶切鉴定,证明插入的DNA片段与PCR扩增的DNA片段大小相符.对整个ORF6进行序列分析,将测序结果与已发表的ATCCVR-2332序列相比较,证实插入片段为PRRSV VR-2332的ORF6片段的cDNA.