探讨miR-215和RUNX1在视网膜母细胞瘤(RB)中的表达水平及临床意义,并研究视网膜母细胞瘤细胞系PMC-RB中miR-215对RUNX1的调控作用。
方法应用qRT-PCR检测RB患者肿瘤组织及癌旁非肿瘤组织、人RB细胞系FMC-RB及人正常视网膜血管内皮细胞系ATCC中miR-215及RUNX1的表达水平。用miR-215模拟物(miR-215-mimic)、miR-NC、si-RUNX1和si-NC分别转染FMC-RB细胞系,分别测定细胞增殖、迁移及侵袭能力,并检测miR-215对RUNX1的调控作用。
结果RB肿瘤组织中miR-215表达水平显著低于癌旁非肿瘤组织,RUNX1 mRNA表达水平高于癌旁非肿瘤组织(P<0.05)。miR-215在PMC-RB细胞中的表达水平低于ATCC中表达水平,而RUNX1 mRNA的表达水平高于ATCC中表达水平(P<0.05)。RB肿瘤组织中miR-215和RUNX1的表达水平与视神经浸润、肿瘤组织分化程度、淋巴结转移等临床病理特征有关(P<0.05)。miR-215-mimic组细胞增殖、迁移及侵袭能力均显著低于miR-NC组(P<0.05)。在转染3′非翻译区(3′UTR)-Wt的细胞中,miR-215-mimic组荧光素酶活性低于miR-NC组(P<0.05);转染miR-215-mimic细胞中RUNX1蛋白表达水平低于转染miR-NC的细胞(P<0.05)。si-RUNX1组细胞增殖、迁移和侵袭能力均低于si-NC组(P<0.05)。在RB肿瘤组织中miR-215表达水平与RUNX1 mRNA表达水平呈负相关。
结论在RB的发生发展过程中,miR-215表达的下调可通过靶向RUNX1来促进肿瘤的恶性进展,miR-215可作为RB诊断的生物学标志物及治疗靶点。