聚乳酸-多巴胺-骨形成发生蛋白-2控释支架的构建及成骨研究

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目的

构建聚乳酸/多巴胺/骨形成发生蛋白-2(PLLA-PDA-BMP-2)控释支架并评价其成骨能力。

方法

构建PLLA-PDA-BMP-2支架,设立PLLA-PDA支架及PLLA支架为对照。以骨髓间充质干细胞(BMSCs)为种子细胞在支架上培养,采用扫描电镜(SEM)、X光电子能谱仪(XPS)、接触角测量仪、共聚焦显微镜观察支架表面结构及细胞生长状态。通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红染色、定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)评价支架上BMSCs的成骨分化能力。

结果

(1)支架表征:PLLA-PDA-BMP-2支架表面氮元素(N)含量为(8.7±0.7)%,高于PLLA-PDA支架[(3.9±0.4)%]与PLLA支架(0%),差异有统计学意义(P=0.001);PLLA-PDA-BMP-2支架表面接触角为(17.6±2.2)°,低于PLLA-PDA支架[(31.4±1.8)°]与PLLA支架[(120.8±5.0)°],差异有统计学意义(P=0.001);(2)体外实验:PLLA-PDA-BMP-2支架上细胞增殖能力优于PLLA-PDA支架与PLLA支架,差异有统计学意义(P=0.003);培养14 d后,PLLA-PDA-BMP-2支架ALP活性为(136.5±7.1) μmol/mg,高于PLLA-PDA支架[(44.2±4.2) μmol/mg]及PLLA支架[(24.4±3.6) μmol/mg],差异有统计学意义(P=0.013);PLLA-PDA-BMP-2支架COL-1和OCN基因表达明显升高,与PLLA-PDA支架及PLLA支架比较,差异有统计学意义(P=0.002)。

结论

PLLA-PDA-BMP-2支架能够长期缓释BMP-2多肽,有效促进BMSCs增殖及成骨分化。

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