【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA核仁小分子RNA宿主基因3(SNHG3)对骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法 qRT-PCR检测成骨细胞hFOB1.19和骨肉瘤细胞SW-1353、HOS
【机 构】
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湖南省儿童医院骨科,湖南长沙 410007
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目的 探讨长链非编码RNA核仁小分子RNA宿主基因3(SNHG3)对骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法 qRT-PCR检测成骨细胞hFOB1.19和骨肉瘤细胞SW-1353、HOS、U-2OS、Saos-2中SNHG3和miR-514a-5p表达.取对数生长期的U-2OS细胞进行转染,分为si-NC组(转染si-NC)、si-SNHG3组(转染si-SNHG3)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-514a-5p组(转染miR-514a-5p)、si-SNHG3+anti-miR-NC组(共转染si-SNHG3和anti-miR-NC)和si-SNHG3+anti-miR-514a-5p组(共转染si-SNHG3和anti-miR-514a-5p).CCK-8法和流式细胞术检测细胞的活性与凋亡情况;Western blot法检测c-Myc、Bax、MMP-2蛋白表达情况;Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭情况;双荧光素酶实验分析SNHG3与miR-514a-5p的靶向关系.结果 骨肉瘤细胞SW-1353、HOS、U-2OS、Saos-2中SNHG3表达高于成骨细胞hFOB1.19,miR-514a-5p表达低于成骨细胞hFOB1.19,差异有统计学意义(P<0.05).si-SNHG3组的SNHG3表达、细胞活力、迁移细胞、侵袭细胞及c-Myc、MMP-2蛋白表达低于si-NC组;细胞凋亡率、Bax蛋白表达高于si-NC组,差异有统计学意义(P<0.05).miR-514a-5p组的miR-514a-5p表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达高于miR-NC组;细胞活力、迁移细胞、侵袭细胞及c-Myc、MMP-2蛋白表达低于miR-NC组,差异有统计学意义(P<0.05).miR-514a-5p组SNHG3野生型荧光素酶活性低于miR-NC组,差异有统计学意义(P0.05).si-SNHG3+anti-miR-514a-5p组的miR-514a-5p表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达低于si-SNHG3+anti-miR-NC组,而细胞活力、迁移细胞、侵袭细胞及c-Myc、MMP-2蛋白表达高于si-SNHG3+anti-miR-NC组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 敲低SNHG3对骨肉瘤细胞的增殖、侵袭、迁移均有较为明显的抑制作用,同时也可促进骨肉瘤细胞凋亡,其作用机制可能与miR-514a-5p有关.
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