【摘 要】
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目的 探讨miR-9-5p在胶质瘤中对瓦博格效应的调控作用及机制情况.方法 选择新疆医科大学第二附属医院2018年5月至2020年10月确诊的30例神经胶质瘤和癌旁组织样品.设立对照组
【机 构】
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新疆医科大学第二附属医院神经外科,新疆乌鲁木齐 830063
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目的 探讨miR-9-5p在胶质瘤中对瓦博格效应的调控作用及机制情况.方法 选择新疆医科大学第二附属医院2018年5月至2020年10月确诊的30例神经胶质瘤和癌旁组织样品.设立对照组、miR-9-5p过表达组及miR-9-5p抑制剂组,采用实时荧光定量PCR分别检测miR-9-5p的表达情况及其与糖酵解相关基因表达的相关性.构建异位肿瘤模型及体外细胞实验,采用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法、葡萄糖摄取分析、乳酸产生量检测及细胞活力检测判断miR-9-5p对胶质瘤及瓦博格效应的影响情况,采用双荧光素酶报告基因检测miR-9-5p与UBE4B的靶向性关系.结果 miR-9-5p过表达组缺氧诱导转录因子1α(HIF1α)蛋白,葡萄糖转运蛋白同工型1(Glut1)、己糖激酶(HK2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05).miR-9-5p抑制剂组HIF1α蛋白,Glut1、HK2、LDHA和VEGF mRNA表达显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05).与对照组比较,miR-9-5p过表达组显著增强了代谢及转移(P<0.05),而miR-9-5p抑制剂组显著降低了U251细胞中的葡萄糖摄取和乳酸生成(P<0.05).miR-9-5p过表达组在处理24 h和48 h后的细胞活力显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而miR-9-5p抑制剂组与对照组比较,细胞活力在24 h和48 h出现明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).miR-9-5p过表达组的肿瘤体积和湿重显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).miR-9-5p过表达组的UBE4B的蛋白质水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而HIF1α及糖酵解相关基因(Glut1、HK2和LDHA)的表达显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-9-5p能够通过UBE4B/HIF1α途径调节胶质瘤的Warburg效应并促进胶质瘤的发生发展.
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