马氏珠母贝4种壳色选育系RAPD反应体系优化

• 作 者: 陈静 刘志刚 王伟 刘铀 杨焕章
• 机 构: 广东海洋大学水产学院,广东海洋大学农学院
• 出 处: 现代农业科学
• 发表日期: 2009年3期
• 关键词: 马氏珠母贝 壳色选育系 RAPD 反应体系 优化 Pinctada martensii shell color selected lines RAPD reac

旨在筛选出马氏珠母贝RAPD反应的最佳体系，为不同壳色马氏珠母贝种质资源遗传多样性和亲缘关系的研究奠定基础。试验以4种壳色马氏珠母贝为材料，采用SDS法进行闭壳肌的总DNA提取并对影响RAPD扩增效果的因素进行优化。通过单因素优化筛选出最佳的25μL反应体系：10×Taqbuffer2.5μL，DNA2.0ng/μL，Mg^2＋3.0mmol/L，引物0.25μmol/L，0.2mmol/LdNTP，Taq酶1.0U；反应程序：94℃预变性5min，然后进行40个循环：94℃变性45s，39℃退