【摘 要】
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利用ＰＣＲ扩增端粒重复序列，通过电泳和银染色测定扩增产物，以电泳胶中６ｂｐ梯状条带确定端粒酶活性。温度３０℃，反应时间为６０ｍｉｎ时可以使酶提液与未知化合物作用后还保持着酶的活性。从电泳的上样
【机 构】
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北京医科大学药物及仿生药物国家重点实验室药理组
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利用ＰＣＲ扩增端粒重复序列，通过电泳和银染色测定扩增产物，以电泳胶中６ｂｐ梯状条带确定端粒酶活性。温度３０℃，反应时间为６０ｍｉｎ时可以使酶提液与未知化合物作用后还保持着酶的活性。从电泳的上样量及不同浓度细胞酶提液的结果表明，最低上样量１０μｌ和细胞酶提液０５μｇ时，能得到清晰６ｂｐ的梯状条带。ＲＮａｓｅ０．０５μｇ对端粒酶活性显示抑制作用，而对ＴａｑＤＮＡ酶没有影响。
The telomere repeats were amplified by PCR, and the amplified products were determined by electrophoresis and silver staining. The telomerase activity was determined by a 6-bp ladder in the electrophoretic gel. Temperature 30 °C, the reaction time of 60min can make enzyme extracts and unknown compounds still maintain the enzyme activity. From the results of electrophoresis and different concentrations of enzyme extracts, a clear 6 bp ladder band was obtained when the minimum sample volume was 10 μl and the cell enzyme extract was 0 5 μg. RNase 0.05 μg showed an inhibitory effect on telomerase activity but no effect on Taq DNA enzyme.
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