【摘 要】
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为了进一步研究扬子鳄IFN-α,构建原核表达载体pET32a-IFN,导入大肠杆菌表达系统后诱导表达,并纯化靶蛋白.使用纯化重组蛋白作为抗原,加入佐剂乳化后免疫3只雌性的6周龄BALB/c小鼠,免疫后第35天对小鼠采血分离血清并测定效价.结果显示,成功构建原核表达载体pET32a-IFN,Western-blot鉴定显示,扬子鳄IFN-α重组蛋白成功表达,大小与预期相符,约为43 ku;免疫后的1号和2号小鼠所产生的多克隆抗体效价均为1∶ 51 200,3号小鼠所产生的多克隆抗体效价为1∶ 25 600,
【机 构】
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南京农业大学农业农村部动物细菌开放实验室,江苏南京 210095;上海市动物疫病预防控制中心,上海 201103;南京农业大学农业农村部动物细菌开放实验室,江苏南京 210095
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为了进一步研究扬子鳄IFN-α,构建原核表达载体pET32a-IFN,导入大肠杆菌表达系统后诱导表达,并纯化靶蛋白.使用纯化重组蛋白作为抗原,加入佐剂乳化后免疫3只雌性的6周龄BALB/c小鼠,免疫后第35天对小鼠采血分离血清并测定效价.结果显示,成功构建原核表达载体pET32a-IFN,Western-blot鉴定显示,扬子鳄IFN-α重组蛋白成功表达,大小与预期相符,约为43 ku;免疫后的1号和2号小鼠所产生的多克隆抗体效价均为1∶ 51 200,3号小鼠所产生的多克隆抗体效价为1∶ 25 600,具有良好的特异性,这为后续扬子鳄IFN-α抗病毒的研究奠定了基础.
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