【摘 要】
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目的:观察通络生骨胶囊(TLSGC)对糖皮质激素致血管内皮细胞功能损伤的影响,并从丝裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路初步探索其作用机制.方法:取正
【机 构】
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承德医学院,河北承德067000;中国中医科学院中药研究所,北京100700;中国中医科学院中药研究所,北京100700
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目的:观察通络生骨胶囊(TLSGC)对糖皮质激素致血管内皮细胞功能损伤的影响,并从丝裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路初步探索其作用机制.方法:取正常SD大鼠胸主动脉环,用甲泼尼龙琥珀酸钠(MPS,0.04 g·L-1)和(或)血管内皮细胞生长因子(VEGF,20 μg· L-1)体外干预,加入TLSGC(12.5,25,50 μg·L-1)连续作用5d,观察血管环芽出的微生血管数目、长度和面积;此外,以甲泼尼龙琥珀酸钠(MPS,0.04 μg·L-1)加入由VEGF(20 μg·L-1)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC),再加入TLSGC(12.5,25,50 μg· L-1),然后分别采用transwell迁移,transwell侵袭及管腔形成实验检测HUVEC的迁移、侵袭及管腔形成能力,并以硝酸还原酶法检测细胞上清中一氧化氮(NO)含量,干粉法检测细胞上清中内皮素-1(ET-1)含量,蛋白免疫印迹法检测细胞中血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2),ERK,磷酸化(p)-ERK,MEK和p-MEK蛋白表达量.结果:与正常组比较,MPS能明显抑制由VEGF诱导的大鼠胸主动脉环微血管数目、长度和面积以及HUVEC细胞迁移、侵袭和管腔形成能力,降低NO并升高ET-1含量,MPS还能明显减少由VEGF诱导的VEGFR2,p-MEK和p-ERK在HUVEC中的蛋白含量(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,TLSGC能剂量依赖地改善由MPS降低的大鼠胸主动脉环微血管数目、长度和面积以及HUVEC细胞迁移、侵袭和管腔形成能力,提高HUVEC中的NO,VEGFR2,p-MEK和p-ERK蛋白含量并降低ET-1含量(P＜0.05,P＜0.01).结论:TLSGC对糖皮质激素所致血管内皮细胞血管生成和分泌功能的损伤具有保护作用,其机制可能与活化MEK/ERK信号通路有关.
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