^131I-NGR的制备及人CD13表达细胞株的体外筛选

• 作 者: 马温惠 汪静 杨卫东 王喆 李桂玉
• 机 构: 第四军医大学西京医院核医学科,西安710032,第四军医大学西京医院核医学科,西安710032,第四军医大学西京医院核医学科,西安710032,第四军医大学西京医院核医学科,西安710032,第四军医
• 出 处: 中华核医学与分子影像杂志
• 发表日期: 2012年32期

目的 通过制备^131I-NGR进行人CD13表达细胞株的体外筛选，探讨NGR对不同肿瘤的靶向性。方法设计合成NGR短肽，以Iodogen法对NGR进行^131I标记，探讨Iodogen法标记的最佳实验条件及标记物性质。将20μl标记产物置于双倍体积的生理盐水和新鲜人血清中混合，在室温和37℃下分别于2、12和24h时用TLC测定放化纯，评价产物的体外稳定性。通过细胞免疫荧光实验和蛋白印迹实验检On,0HT-1080、HUVEC、HepG2、U87Mg、PC-3、HT-29和MCF-7细胞株的CD13表达。对阳性表达细胞株进行^131I-NGR受体分析。以四甲基偶氮唑蓝（MTF）法测定不同浓度Na^131I、NGR和^131I-NGR在24、48和72h对HT-1080和HT-29细胞株的体外生长抑制率，采用单因素方差分析进行统计分析。结果成功标记^131I-NGR，最佳标记条件为^131I18．5MBq、NGR10μg和Iodogen20μg，标记率为（93．7±2．5）％，比活度达1．41TBq／mmol。标记后稳定性良好，24h后标记率仍〉87％。免疫荧光实验和蛋白印迹实验结果证实HT-1080、HUVEC、HepG2、U87Mg和PC-3细胞株CD13表达均为阳性，其中HT-1080细胞株为强阳性，而HT-29和MCF-7细胞株CD13为阴性表达。HT-1080细胞体外受体结合实验提示1h为最佳结合时间，测得蚝值为7．3nmol／L，Bmax为0．302nmol／L。与HT-29细胞相比，^131I-NGR对HT-1080细胞株的生长抑制作用更强，并呈一定的剂量-效应和时间-效应关系；在72h时，3700MBq／L ^131I-NGR对HT-1080的抑制率达（67．9±3．4）％。结论经Iodogen法制备^131I-NGR具有标记时间短、标记率高且标记产物稳定性好的特点。体外实验筛选出CDcr表达强阳性的人肿瘤细胞株HT-1080，其与^131I-NGR结合特异性高。