【摘 要】
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目的 观察高水平的HBV复制对QSG-7701细胞可能产生的致病效应.方法 采用磷酸钙沉淀方法转染质粒pUC18-HBV1.2(实验组)和空质粒pUC18(对照组)至QSG-7701细胞,细胞计数观察细胞
【机 构】
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北京大学肝病研究所,北京大学人民医院,100044
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目的 观察高水平的HBV复制对QSG-7701细胞可能产生的致病效应.方法 采用磷酸钙沉淀方法转染质粒pUC18-HBV1.2(实验组)和空质粒pUC18(对照组)至QSG-7701细胞,细胞计数观察细胞生长曲线.转染后4 d,采用荧光实时定量PCR方法检测培养上清中HBV DNA水平;免疫荧光细胞化学染色检测细胞内的HBsAg表达;电子显微镜和末端脱氧核苷酸转移酶介导duTP缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;Oliga信号传导基因芯片检测实验组和对照组的基因差异表达.结果 对照组细胞转染6 d后细胞数量增加(8.3±1.2)倍,凋亡细胞极少见.实验组在转染后6 d细胞数量仅增加(1.1±0.2)倍,HBsAg阳性细胞35.4%±6.7%,细胞凋亡占15.2%±4.3%.基因差异表达谱分析显示与细胞生长和凋亡相关的部分基因如CASP3(2.7981)、CASP7(2.2643)、3-Apr(3.5013)、CDC2(0.4380)、MAPK6(0.4447)和MAP3K2(0.2785)等表达水平发生显著改变.结论 高水平的HBV复制明显抑制QSG-7701细胞生长,并诱导部分细胞发生凋亡.
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