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摘要：目的 对龙脑樟果实挥发油成分进行分析鉴定。方法 采用水蒸气蒸馏法提取龙脑樟果实的挥发油成分，通过气相色谱-质谱法对该挥发油进行成分析鉴定。结果 共分离出50种化学成分，确认其中的42种，占总峰面积的99.536%；右旋龙脑的相对含量最高，占总峰面积的50.684%。结论 龙脑樟果实部位挥发油中天然右旋龙脑的含量较高，可以作为工业化生产提取天然冰片的原料进行综合利用。
关键词：龙脑樟；果实；挥发油；气相色谱-质谱法
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.11.022
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）11-0058-03
龙脑樟Cinnamomum camphora chvar.Borneol属于樟树Cinnamomum camphora（L.） Presl中一个稳定的化学类型——龙脑型樟树，是一种稀缺的药材资源。龙脑樟性味辛温无毒，其树根、树皮、树叶、果实、枝、树干、叶均有散寒止痛、温中健脾、补火助阳等功效，可用于治疗各种痛症及脾胃虚寒、肾阳虚衰、瘀血内阻等证。龙脑樟树是目前已发现的天然右旋龙脑（D-龙脑）含量最高的植物资源，其叶片精油含量高达2%，油中D-龙脑的含量在85%以上[1]。
右旋龙脑又称为天然冰片，是珍贵的传统中药材和高级香料，也是日用化工和食品工业中的高档添加剂，原产于印尼的苏门答腊群岛，为龙脑香树Dryobalanops aromatica Gaerthn f.树脂提取所得结晶。我国无龙脑香树资源，历来依靠从印尼
通讯作者：曾惠芳，E-mail：gancaozhf@126.com
等国进口天然冰片，进口量少且价格十分昂贵[2]。
目前，吉安地区已建成龙脑樟的人工原料林，进行提取右旋龙脑的工业化生产，其生产天然冰片产品已被2005年版《中华人民共和国药典》收载[3]。研究显示，该地区龙脑樟的工业化生产主要采用枝叶[4-5]，其他部位的研究应用较少，且尚未见龙脑樟果实部位的相关报道。为了进一步开发利用龙脑樟，本试验采用水蒸汽蒸馏法提取龙脑樟果实的挥发油成分，通过气相色谱-质谱法（GC-MS）对该挥发油进行成分分析鉴定，为龙脑樟果实部位的综合利用及工业化生产提取天然冰片提供依据。
1 仪器与试药
Agilent technologies 7890A-5975C MSD 气相质谱联用仪，含自动进样器（美国安捷伦公司）；Ratavapor R-Ⅱ旋转蒸发仪（瑞±步琪公司）；SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司）；RTHW电热套（巩义市予华仪器有限责任
公司）；圆底烧瓶；挥发油提取器；回流冷凝管等。
龙脑樟成熟果实由江西省吉安市林科天然冰片厂提供，采自江西省吉安市天然冰片厂人工原料林，经广州中医药大学苏子仁研究员鉴定为樟科樟属植物龙脑樟Cinnamomum camphora chvar.Borneol的成熟果实，阴干密闭低温保存；氦气、氢气和空气为色谱纯，购自广州气体厂有限公司；其他试剂均为分析纯。
2 方法
2.1 龙脑樟果实挥发油的提取
取龙脑樟果实200 g，捣碎，按2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅩD-挥发油测定法中水蒸气蒸馏法操作提取挥发油，挥发油层用无水乙醚萃取2次，合并萃取液，无水硫酸钠干燥，过滤，低温回收至无乙醚味，密闭冷藏，计算收油率。收油率（%）=所提取挥发油量÷龙脑樟果实质量×100。
2.2 分析条件
2.2.1 气相色谱条件 色谱柱：Agilent HP-5MS气相毛细管柱（5%-苯基-甲基聚硅氧烷，30 m×0.25 mm×0.25 ?m）；程序升温：起始温度为60 ℃，1 ℃/min升温至80 ℃，保持0 min，再以4 ℃/min升温至200 ℃，保持5 min；载气为高纯氦气，流速1.0 mL/min，分流比1∶60；进样口温度：250 ℃；进样量：1 ?L。
2.2.2 质谱条件 EI离子源，离子源温度：230 ℃；电离能：70 eV；接口温度：280 ℃；倍增器电压：1.795 kV；数据采集速率：2.94次/s；质量扫描范围：40～400 m/z；溶剂延迟：2.5 min。
3 结果与分析
3.1 挥发油提取结果
龙脑樟果实经水蒸气蒸馏共提取挥发油3.4 mL，收油率为1.7%。挥发油为无色半透明油状液体，具有天然冰片的特殊浓郁嗅味。
3.2 挥发油成分分析结果
按 “2.2”项下色谱与质谱条件，进行龙脑樟果实挥发油的GC-MS分析，得到总离子流图（见图1），GC共分离出50种组分。所得色谱和质谱信息，通过NIST08/WILEY275等标准图谱库检索，共确认42种成分，均为萜类成分。采用面积归一法确定各个成分的相对百分含量（见表1），所鉴定的42种化学成分的相对含量总和占挥发油总量的99.536%。
4 讨论
由表1可知，龙脑樟果实挥发油已确定的42种成分均为萜类成分，其相对含量总和占挥发油总量的99.536%。含量接近和大于l%的有13种，其相对含量总和占挥发油总量的94.688%，其中含量最高位为D-龙脑（50.684%），其余成分为甲基丁香酚（10.729%）、1，8-桉叶油素（10.49%）、黄樟醚（5.216%）、D-柠檬烯（4.578%）、α-蒎烯（3.034%）、反式香叶醇（1.939%）、莰烯（1.914%）、樟脑（1.555%）、β-月桂烯（1.394%）、4-松油醇（1.194%）、β-蒎烯（0.976%）、γ-松油烯（0.965%）。 龙脑樟果实挥发油部分已确认的主要成分与文献报道中各部位挥发油的化学成分相类似[6-8]，果实部位D-龙脑的相对含量为叶子部位的60%以上。本研究结果提示果实部位天然D-龙脑的含量较高，可作为工业化生产提取天然冰片的原料。
萜类化合物是存在于自然界的具有多种生物活性的一类化合物。研究表明，甲基丁香酚具有明显镇咳、祛痰、镇静、镇痛作用[9]；1，8-按叶油素可以治疗流感、感冒细菌性痢疾、肠炎及各种感染[10]；樟脑有兴奋、强心、消炎、镇痛、抗菌、止咳、促渗、杀螨、减低线粒体呼吸、调节肝药酶等药理作用，并与其他药物相互作用[11]；α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯、月桂烯均具有一定的镇咳、祛疾、抗真菌活性[12]；4-松油醇以及反式香叶醇具有一定的平喘作用[12]。
以上表明，龙脑樟果实挥发油中除含主要化学成分D-龙脑外，挥发油中其他含量较高的成分也具有一定活性，因此进一步开发利用的价值较大。
参考文献：
[1] 欧阳少林，龙光远，黄璐琦，等.天然冰片的新资源[J].江西林业科技， 2005（5）：38.
[2] 吴茂隆，陈小兰，廖振欣，等.龙脑樟研究利用及其发展前景[J].江西林业科技，2011（2）：33-35.
[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：化学工业出版社，2005：40.
[4] 陈建南，曾惠芳，李耿，等.龙脑樟挥发油及天然冰片成分分析[J].中药材，2009，28（9）：781-782.
[5] 黄慧莲，林涛，熊梅，等.龙脑樟枝叶中挥发油化学成分GC-MS分析[J].世界中医药，2012，7（5）：453-455.
[6] 陈小兰，曾红高，谢正平，等.龙脑樟叶部精油在不同蒸馏时段的出油率和化学成分[J].江西林业科技，2011（3）：1-2.
[7] 丁雄，苏健裕，石磊，等.龙脑樟鲜叶挥发油成分及其抗菌活性的研究[J].食品工业科技，2012，33（18）：167-171.
[8] Shi Shujiang， Wu Qiduan， Su Jiyan， et al. Composition analysis of volatile oils from flowers， leaves and branches of Cinnamomum camphora chvar. Borneol in China[J]. Journal of Essential Oil Research，DOI：10.1080/10412905.2013.809323.
[9] 周慧秋，于滨，乔婉红，等.甲基丁香酚的药理作用研究[J].中医药学报，2000，28（2）：79-80.
[10] 田玉红，张祥民，黄泰松，等.桉叶油的研究进展[J].食品与发酵工业， 2007，33（10）：139-143.
[11] 丁元刚，马红梅，张伯礼.樟脑药理毒理研究回顾及安全性研究展望[J].中国药物警戒，2012，9（1）：38-42.
[12] 郭英.GC-MS法对龙脑樟的质量评价研究[D].长沙：湖南中医药大学， 2009.
（收稿日期：2013-05-09，编辑：陈静）
关键词：龙脑樟；果实；挥发油；气相色谱-质谱法
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.11.022
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）11-0058-03
龙脑樟Cinnamomum camphora chvar.Borneol属于樟树Cinnamomum camphora（L.） Presl中一个稳定的化学类型——龙脑型樟树，是一种稀缺的药材资源。龙脑樟性味辛温无毒，其树根、树皮、树叶、果实、枝、树干、叶均有散寒止痛、温中健脾、补火助阳等功效，可用于治疗各种痛症及脾胃虚寒、肾阳虚衰、瘀血内阻等证。龙脑樟树是目前已发现的天然右旋龙脑（D-龙脑）含量最高的植物资源，其叶片精油含量高达2%，油中D-龙脑的含量在85%以上[1]。
右旋龙脑又称为天然冰片，是珍贵的传统中药材和高级香料，也是日用化工和食品工业中的高档添加剂，原产于印尼的苏门答腊群岛，为龙脑香树Dryobalanops aromatica Gaerthn f.树脂提取所得结晶。我国无龙脑香树资源，历来依靠从印尼
通讯作者：曾惠芳，E-mail：gancaozhf@126.com
等国进口天然冰片，进口量少且价格十分昂贵[2]。
目前，吉安地区已建成龙脑樟的人工原料林，进行提取右旋龙脑的工业化生产，其生产天然冰片产品已被2005年版《中华人民共和国药典》收载[3]。研究显示，该地区龙脑樟的工业化生产主要采用枝叶[4-5]，其他部位的研究应用较少，且尚未见龙脑樟果实部位的相关报道。为了进一步开发利用龙脑樟，本试验采用水蒸汽蒸馏法提取龙脑樟果实的挥发油成分，通过气相色谱-质谱法（GC-MS）对该挥发油进行成分分析鉴定，为龙脑樟果实部位的综合利用及工业化生产提取天然冰片提供依据。
1 仪器与试药
Agilent technologies 7890A-5975C MSD 气相质谱联用仪，含自动进样器（美国安捷伦公司）；Ratavapor R-Ⅱ旋转蒸发仪（瑞±步琪公司）；SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司）；RTHW电热套（巩义市予华仪器有限责任
公司）；圆底烧瓶；挥发油提取器；回流冷凝管等。
龙脑樟成熟果实由江西省吉安市林科天然冰片厂提供，采自江西省吉安市天然冰片厂人工原料林，经广州中医药大学苏子仁研究员鉴定为樟科樟属植物龙脑樟Cinnamomum camphora chvar.Borneol的成熟果实，阴干密闭低温保存；氦气、氢气和空气为色谱纯，购自广州气体厂有限公司；其他试剂均为分析纯。
2 方法
2.1 龙脑樟果实挥发油的提取
取龙脑樟果实200 g，捣碎，按2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅩD-挥发油测定法中水蒸气蒸馏法操作提取挥发油，挥发油层用无水乙醚萃取2次，合并萃取液，无水硫酸钠干燥，过滤，低温回收至无乙醚味，密闭冷藏，计算收油率。收油率（%）=所提取挥发油量÷龙脑樟果实质量×100。
2.2 分析条件
2.2.1 气相色谱条件 色谱柱：Agilent HP-5MS气相毛细管柱（5%-苯基-甲基聚硅氧烷，30 m×0.25 mm×0.25 ?m）；程序升温：起始温度为60 ℃，1 ℃/min升温至80 ℃，保持0 min，再以4 ℃/min升温至200 ℃，保持5 min；载气为高纯氦气，流速1.0 mL/min，分流比1∶60；进样口温度：250 ℃；进样量：1 ?L。
2.2.2 质谱条件 EI离子源，离子源温度：230 ℃；电离能：70 eV；接口温度：280 ℃；倍增器电压：1.795 kV；数据采集速率：2.94次/s；质量扫描范围：40～400 m/z；溶剂延迟：2.5 min。
3 结果与分析
3.1 挥发油提取结果
龙脑樟果实经水蒸气蒸馏共提取挥发油3.4 mL，收油率为1.7%。挥发油为无色半透明油状液体，具有天然冰片的特殊浓郁嗅味。
3.2 挥发油成分分析结果
按 “2.2”项下色谱与质谱条件，进行龙脑樟果实挥发油的GC-MS分析，得到总离子流图（见图1），GC共分离出50种组分。所得色谱和质谱信息，通过NIST08/WILEY275等标准图谱库检索，共确认42种成分，均为萜类成分。采用面积归一法确定各个成分的相对百分含量（见表1），所鉴定的42种化学成分的相对含量总和占挥发油总量的99.536%。
4 讨论
由表1可知，龙脑樟果实挥发油已确定的42种成分均为萜类成分，其相对含量总和占挥发油总量的99.536%。含量接近和大于l%的有13种，其相对含量总和占挥发油总量的94.688%，其中含量最高位为D-龙脑（50.684%），其余成分为甲基丁香酚（10.729%）、1，8-桉叶油素（10.49%）、黄樟醚（5.216%）、D-柠檬烯（4.578%）、α-蒎烯（3.034%）、反式香叶醇（1.939%）、莰烯（1.914%）、樟脑（1.555%）、β-月桂烯（1.394%）、4-松油醇（1.194%）、β-蒎烯（0.976%）、γ-松油烯（0.965%）。 龙脑樟果实挥发油部分已确认的主要成分与文献报道中各部位挥发油的化学成分相类似[6-8]，果实部位D-龙脑的相对含量为叶子部位的60%以上。本研究结果提示果实部位天然D-龙脑的含量较高，可作为工业化生产提取天然冰片的原料。
萜类化合物是存在于自然界的具有多种生物活性的一类化合物。研究表明，甲基丁香酚具有明显镇咳、祛痰、镇静、镇痛作用[9]；1，8-按叶油素可以治疗流感、感冒细菌性痢疾、肠炎及各种感染[10]；樟脑有兴奋、强心、消炎、镇痛、抗菌、止咳、促渗、杀螨、减低线粒体呼吸、调节肝药酶等药理作用，并与其他药物相互作用[11]；α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯、月桂烯均具有一定的镇咳、祛疾、抗真菌活性[12]；4-松油醇以及反式香叶醇具有一定的平喘作用[12]。
以上表明，龙脑樟果实挥发油中除含主要化学成分D-龙脑外，挥发油中其他含量较高的成分也具有一定活性，因此进一步开发利用的价值较大。
参考文献：
[1] 欧阳少林，龙光远，黄璐琦，等.天然冰片的新资源[J].江西林业科技， 2005（5）：38.
[2] 吴茂隆，陈小兰，廖振欣，等.龙脑樟研究利用及其发展前景[J].江西林业科技，2011（2）：33-35.
[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：化学工业出版社，2005：40.
[4] 陈建南，曾惠芳，李耿，等.龙脑樟挥发油及天然冰片成分分析[J].中药材，2009，28（9）：781-782.
[5] 黄慧莲，林涛，熊梅，等.龙脑樟枝叶中挥发油化学成分GC-MS分析[J].世界中医药，2012，7（5）：453-455.
[6] 陈小兰，曾红高，谢正平，等.龙脑樟叶部精油在不同蒸馏时段的出油率和化学成分[J].江西林业科技，2011（3）：1-2.
[7] 丁雄，苏健裕，石磊，等.龙脑樟鲜叶挥发油成分及其抗菌活性的研究[J].食品工业科技，2012，33（18）：167-171.
[8] Shi Shujiang， Wu Qiduan， Su Jiyan， et al. Composition analysis of volatile oils from flowers， leaves and branches of Cinnamomum camphora chvar. Borneol in China[J]. Journal of Essential Oil Research，DOI：10.1080/10412905.2013.809323.
[9] 周慧秋，于滨，乔婉红，等.甲基丁香酚的药理作用研究[J].中医药学报，2000，28（2）：79-80.
[10] 田玉红，张祥民，黄泰松，等.桉叶油的研究进展[J].食品与发酵工业， 2007，33（10）：139-143.
[11] 丁元刚，马红梅，张伯礼.樟脑药理毒理研究回顾及安全性研究展望[J].中国药物警戒，2012，9（1）：38-42.
[12] 郭英.GC-MS法对龙脑樟的质量评价研究[D].长沙：湖南中医药大学， 2009.
（收稿日期：2013-05-09，编辑：陈静）