【摘 要】
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根据GenBank已发表粪肠球菌Ace基因（AF260879）的核苷酸序列设计1对引物,通过PCR扩增Ace基因保守序列A片段部分序列,将其克隆到pET-32a（＋）裁体中,构建了原核表达载体pET-32a（＋）-Ace,转
【基金项目】
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河南省重大攻关项目（112101110100）, 郑州市重点实验室基金资助项目（114PYZX509）
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根据GenBank已发表粪肠球菌Ace基因（AF260879）的核苷酸序列设计1对引物,通过PCR扩增Ace基因保守序列A片段部分序列,将其克隆到pET-32a（＋）裁体中,构建了原核表达载体pET-32a（＋）-Ace,转化大肠杆菌BL21（DE3）后,成功表达并纯化了重组蛋白;以此重组蛋白作为抗原建立了检测粪肠球菌Ace抗体的间接ELISA方法。经反复试验,确定该间接ELISA的最佳反应条件为：抗原包被浓度为1mg/L,被检血清稀释度为1∶800,1%BSA为封闭液,血清和二抗的作用时间均为60min
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