小鼠IGFBP-6基因shRNA的设计与筛选

• 作 者: 房希碧 田来明 郝林琳 官员 马强 张英 张永亮 刘松财
• 机 构: 吉林大学动物科学学院,长春市农业科学院,华南农业大学动物科学学院
• 出 处: 中国兽医学报
• 发表日期: 2013年4期
• 关键词: IGFBP-6 SHRNA NIH-3T3细胞 IGFBP-6 shRNA NIH-3T3
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30871839,31072102,31101781）

胰岛素样生长因子结合蛋白6（IGFBP-6）是胰岛素样生长因子结合蛋白家族（IGFBPs）的-员，IGFBP-6不同于IGFBPl-5，其与IGF-2的亲和力显著的优先于IGF-1，受到研究者的广泛关注。本研究在小鼠IGFBP-6基因mR—NA的806、760和908bp处找到潜在靶位点，设计3条shRNA干扰载体，并合成DNAOligo，体外退火成双链DNA，插入pGU6／GFP／Neo载体，获得3条针对目的基因不同靶序列的干扰载体，瞬时转染NIH-3T3小鼠胚胎成纤维细胞48h后，利用流式细胞技术分选