【摘 要】
：
目的 构建大肠埃希菌严谨反应蛋白编码基因relA的原核表达载体,通过生物信息学方法分析RelA蛋白的结构和功能,为阐明RelA介导细菌严谨反应的分子机制奠定基础. 方法 利用分子
【机 构】
：
山西医科大学汾阳学院医学检验系,山西汾阳032200
论文部分内容阅读
目的 构建大肠埃希菌严谨反应蛋白编码基因relA的原核表达载体,通过生物信息学方法分析RelA蛋白的结构和功能,为阐明RelA介导细菌严谨反应的分子机制奠定基础. 方法 利用分子克隆技术得到relA的CDS序列,利用基因工程手段将CDS序列连接到原核表达载体pET-22b中,通过抗性基因筛选和双向测序验证,得到重组表达载体pET-22b-relA.采用Protparam、TMHMM、ProtScale ExPASy、PSORTⅡ、SignalP、InterPro、UniProt、NetPhos 3.1、NetNGlyc 1.0、NetOGlyc 4.0、Blast等生物信息学软件和数据库对大肠埃希菌RelA蛋白的理化性质、功能位点、翻译后修饰、三维结构及蛋白相互作用网络等生物学特性进行系统分析;利用Clustal X2和MEGA7.0软件对RelA蛋白进行基于氨基酸序列的同源性分析和系统进化分析. 结果 成功构建relA基因的原核表达载体pET-22b-relA.生物信息学分析RelA蛋白由744个氨基酸组成,相对分子质量84×103 Da,等电点6.29,有两个卷曲螺旋结构,无跨膜螺旋区,为亲水性蛋白.RelA的N-末端结构域包括PH和SYNTH,C末端结构域包括TGS、α螺旋区、CC及ACT亚结构域;该蛋白主要在细胞质发挥功能,含有10个NTP结合位点,2个金属离子结合位点,16个合成酶活性位点,53个潜在的磷酸化位点和8个可能的糖基化位点;RelA在细菌之间高度保守,与大肠埃希菌RelA亲缘关系最近的是福氏志贺菌,其次是柯氏柠檬酸杆菌. 结论 RelA在细菌之间高度保守,提示其在细胞生命活动中具有重要功能,RelA通过与核糖体和tRNA的相互作用介导细菌的严谨反应,因此RelA是一种重要的翻译因子.本研究为全面揭示RelA分子的生物学功能,设计和筛选靶向RelA的新型抗菌药物提供了线索和依据.
其他文献
神经莱姆病是由伯氏疏螺旋体感染引起的神经系统感染性疾病,已引起医学界高度重视.目前实验室对神经莱姆病的检测方法主要有脑脊液生化检测、血清学检测和病原体直接检测等.
目的 建立一种含内参基因的解脲脲原体(Uu)和微小脲原体(Up)相对定量的荧光PCR分型方法,克服标本采样差异对检测结果的影响,了解患者脲原体感染的生物分群及病原载量. 方法
很多人见到体检报告时，可能会看到“窦性心律”“期前收缩”等心电图检查结果。有的人对此十分紧张，担心自己得了严重的疾病。现在，让我们一起来学习一下如何看懂体检报告中的心电图。 窦性心律就是正常心率 心电图是心内科最常见的检查之一。心脏的每一次跳动都是在电冲动的控制下完成的，没有电冲动，心脏就不跳了。临床上很多疾病需要心电图来帮助识别与诊断，如各种心律失常、急性心肌梗死等。 心脏里有掌管心脏电冲
目的 运用生物学信息方法分析鸟分枝杆菌相关致病基因MAV2054编码蛋白的生物学特征. 方法 从NCBI中检索鸟分枝杆菌MAV2054蛋白基因信息.使用序列的fasta格式用在线软件预测MA
目的 检测和分析新生儿窒息并发医院感染的病原菌分布及血清淀粉酶样蛋白A(serum amylase-like proteinA,SAA)及中性粒细胞CD64水平,为临床诊断提供参考. 方法 本院2017年1月
近日，82岁的陈老因受凉后引发肺部感染住进了医院。医生听诊后发现陈老肺里的痰液很多，告知家属，除进行静脉输液抗感染治疗外，需要使用雾化吸入及祛痰药物进行治疗，但陈老现在身体虚弱，没有力气将痰液咳出，家属要给陈老叩背，帮助他排出痰液。那么，叩背排痰该怎么做呢？ 叩背排痰法，是通过叩击背部，促进附着在气管、支气管、肺内的分泌物松动以利其排出，防止肺泡萎缩和肺不张，有利于肺炎的控制。 叩背排痰适用人
国登革热是由携带登革病毒的白纹伊蚊或埃及伊蚊叮咬人类传播的一种重要虫媒传染病,主要流行在热带亚热带国家或地区.老挝登革热流行较为严重,1979年首次报道登革热病例,并自
35岁的田先生几个月前在国外出差。那边气温高，环境和国内差别较大，刚去没几天，田先生就出现胸口疼痛。走1000米，胸口就痛，回家躺一会儿便缓解。就这样反反复复，疼痛程度越来越重，发作越来越频繁，时间也越来越长。田先生觉得是水土不服，一直没去医院。 回国半个月，直到去医院就诊前的一周，田先生的所有症状突然都消失了。在妻子的反復催促下，他才勉强到医院看病。 田先生的接诊医生高度怀疑他是心肌梗死，而
愉悦精神，调节情绪能提高晚年生活的质量，进而延长人的寿命。 忘年之乐 莫思老，常思少，忘年之交不可少。多和青年人交朋友，能使人萌发童真，心灵不老。 想象之乐 回忆年轻时顺心的事，能使人沉浸在快乐和幸福的追忆之中;畅想未来的美景，更让人倍感夕阳无限好。 知足之樂 富也安然，贫也安然。大鱼大肉虽属美味，粗茶淡饭更香甜。 天伦之乐 和谐浓厚的亲情关系胜过长生药，置身于祖孙三代的欢
目的 检测子宫颈高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染患者阴道分泌物的病原菌分布及耐药分析,并分析其对HPV感染转归的影响. 方法 2017年9月-2019年9月在本院就诊的妇女500例,均