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获取人细小病毒B19(HPV B19) VP1独特区基因,并进行序列测定及变异分析,为研制诊断试剂及预防疫苗创造条件。
方法应用聚合酶链反应(PCR)技术从1例急性特发性血小板减少性紫癜患儿的血清中扩增HPV B19 VP1独特区基因片段,将其克隆至pGEM-T easy载体,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,测定目的基因的序列。
结果成功地扩增到HPV B19 VP1独特区全长基因,长度为705个核苷酸,测定结果与Genbank中Gallinella G和Venturoli S所发表的HPV B19 VP1独特区全长基因序列比较,有2处核苷酸发生突变,但所编码的氨基酸均未发生变化。
结论(1)HPV B19 VP1独特区有基因变异;(2)构建了HPV B19 VP1独特区基因的重组质粒,所获实验结果为深入研究奠定了基础。