用大肠杆菌游离细胞酶法合成核苷药物

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研究了采用大肠杆菌游离细胞核苷磷酸化酶合成核苷药物过程中反应平衡常数和底物转化率的计算方法及其变化规律,阐明了游离细胞内核苷磷酸化酶的活力与细胞的培养、菌体的预处理方式密切相关。实验结果表明,大肠杆菌湿菌体经4°C干燥处理2~3d后,胞内核苷磷酸化酶不易失活,并能有效地降低胞内抑制物对酶反应的抑制作用。与湿菌体相比,干燥菌体用于酶反应时底物的转化率可提高33.5%。 The calculation method of the reaction equilibrium constant and substrate conversion rate during the synthesis of nucleoside drugs by Escherichia coli free nucleoside phosphorylase was studied, and the variation rule was clarified. The activity of free nucleoside phosphorylase and the culture of cells were clarified. Body pretreatment methods are closely related. The experimental results show that the E. coli wet cells after 2 ~ 3d drying at 4 ° C, intracellular nucleoside phosphorylase is not easy to inactivation, and can effectively reduce the inhibitory effect of intracellular inhibitors on the enzyme reaction. Compared with wet cells, the conversion rate of substrate increased 33.5% when dry cells were used for enzyme reaction.
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