TRPM2在H9N2猪流感病毒感染小鼠PMVEC损伤中的表达与作用

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nqwei
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目的:探讨瞬时受体电位阳离子通道 M2(TRPM2)在 H9N2猪流感病毒(H9N2-SIV)感染小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)损伤中的表达与作用.方法:采用 H9N2-SIV感染小鼠PMVEC(每组设立 3个重复).在病毒感染后 24 h和 48 h进行采样,根据试剂盒方法测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、活性氧簇(ROS)和一氧化氮合成酶(NOS)的变化;电镜观察 PMVEC超微结构变化;利用 Transwell培养 PMVEC单层细胞,测定跨膜电阻及辣根过氧化物酶渗出率;real-time PCR和 Western blot方法检测 TRPM2 mRNA与蛋白的表达;采用 Annexin V/PI双染法观察病毒感染细胞的凋亡情况.结果:H9N2-SIV感染后小鼠 PMVEC 中 GSH-Px和SOD活性显著下降,而 ROS水平和 NOS活性显著高于未感染对照组(P<0.01);病毒感染细胞细胞器明显减少,出现空泡化结构,线粒体基质减少,细胞发生凋亡;病毒感染后跨膜电阻值明显降低,辣根过氧化物酶渗出率则显著增加;TRPM2 mRNA和蛋白表达随病毒感染时间增加显著升高(P < 0.01);Annexin V/PI双染法显示病毒感染细胞的胞膜荧光显著增强,同时大量细胞的胞核显现红色,表明大量细胞发生凋亡现象.结论:TRPM2在 H9N2-SIV感染 PMEVC过程中表达明显增强,提示其参与了四N2-SIV感染导致的 PMVEC损伤和凋亡过程.
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