【摘 要】
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目的 探讨徐长卿丹皮酚对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤的影响及其作用通路.方法 IL-1β诱导体外分离培养大鼠软骨细胞,徐长卿丹皮酚作用后,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡,酶联免疫吸附试验检测炎性因子干扰素(IFN)-γ、IL-6和IL-8水平,Western印迹检测凋亡相关蛋白酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3和酶切caspase-9、基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9和MMP-13、性别决定区Y框蛋白(SOX)-9和Ⅱ型胶原蛋白(Col-Ⅱ)及Wnt/β-连环蛋白(
【机 构】
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黔西南州中医院骨伤科,贵州 兴义 562400
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目的 探讨徐长卿丹皮酚对白细胞介素(IL)-1β诱导的软骨细胞损伤的影响及其作用通路.方法 IL-1β诱导体外分离培养大鼠软骨细胞,徐长卿丹皮酚作用后,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡,酶联免疫吸附试验检测炎性因子干扰素(IFN)-γ、IL-6和IL-8水平,Western印迹检测凋亡相关蛋白酶切含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3和酶切caspase-9、基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9和MMP-13、性别决定区Y框蛋白(SOX)-9和Ⅱ型胶原蛋白(Col-Ⅱ)及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白Wnt1和β-catenin表达水平.加入Wnt/β-catenin信号通路激活剂,观察徐长卿丹皮酚对IL-1β诱导的软骨细胞上述各指标的影响.结果 IL-1β诱导软骨细胞后,细胞凋亡率、酶切caspase-3和酶切caspase-9蛋白表达、IFN-γ、IL-6和IL-8炎性因子、MMP-3、MMP-9和MMP-13蛋白表达、Wnt1和 β-catenin蛋白表达均显著升高(均P<0.05),SOX-9和Col-Ⅱ蛋白表达均显著降低(均P<0.05).徐长卿丹皮酚作用后,IL-1β诱导的软骨细胞凋亡率、酶切caspase-3和酶切caspase-9蛋白表达、IFN-γ、IL-6和IL-8炎性因子、MMP-3、MMP-9和MMP-13蛋白表达、Wnt1和β-catenin蛋白表达均显著降低(均P<0.05),SOX-9和Col-Ⅱ蛋白表达均显著升高(均P<0.05).Wnt/β-catenin通路激活剂的加入,显著降低了徐长卿丹皮酚对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡、炎性因子IFN-γ、IL-6和IL-8及MMP-3、MMP-9和MMP-13蛋白表达的抑制作用,而且显著降低了对SOX-9和Col-Ⅱ蛋白表达的促进作用(均P<0.05).结论 徐长卿丹皮酚可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路保护IL-1β诱导的软骨细胞损伤.
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