【摘 要】
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目的 探讨miR-30b-3p对H2 O2诱导的脐静脉血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响及调控机制.方法 H2 O2诱导损伤EVC-304细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-30b-3p和CXCL16 mRNA水平,Western印迹检测血清CXC趋化因子配体(CXCL)16蛋白水平.构建miR-30b-3p过表达或CXCL16表达抑制的EVC-304细胞,H2O2诱导其损伤后,酶联免疫吸附试验检测细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物还原酶(GSH-Px)水平,流式细胞仪检测
【机 构】
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西宁市第二人民医院心血管内科,青海 西宁 810003;吴忠市人民医院心血管内科
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目的 探讨miR-30b-3p对H2 O2诱导的脐静脉血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响及调控机制.方法 H2 O2诱导损伤EVC-304细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-30b-3p和CXCL16 mRNA水平,Western印迹检测血清CXC趋化因子配体(CXCL)16蛋白水平.构建miR-30b-3p过表达或CXCL16表达抑制的EVC-304细胞,H2O2诱导其损伤后,酶联免疫吸附试验检测细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物还原酶(GSH-Px)水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western印迹检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和酶切谷半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3水平.双荧光素酶报告基因实验验证miR-30b-3p与CXCL16之间靶向调控关系.结果 H2 O2可显著降低EVC-304细胞中miR-30b-3p、SOD和GSH-Px水平、Bcl-2蛋白水平,提高MDA水平、凋亡率、Bax和酶切caspase3蛋白水平(P<0.05).过表达miR-30b-3p或抑制CXCL16表达显著提高H2 O2诱导的EVC-304细胞中SOD和GSH-Px水平、Bcl-2蛋白水平,显著降低MDA水平、凋亡率、Bax和酶切caspase3蛋白水平(P<0.05).miR-30b-3p负调控CXCL16表达,过表达CXCL16逆转了过表达miR-30b-3p对EVC-304细胞氧化应激和凋亡的影响.结论 过表达miR-30b-3p通过靶向CXCL16降低了H2 O2诱导的血管内皮细胞氧化应激和凋亡.
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