【摘 要】
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目的 探讨富含血小板血浆(PRP)来源外泌体(PRP-Exo)对体外白介素1β(IL-1β)处理的软骨细胞的保护作用和分子机制.方法 分离和纯化PRP-Exo,并鉴定和表征.IL-1β处理大鼠软骨细胞模拟体外骨关节炎(OA)中的软骨细胞(IL-1β组),IL-1β联合使用PRP-Exo(IL-1β+PRP-Exo组)或活化模式的PRP(PRP-As)(IL-1β+PRP-As组)分别作用于细胞,CCK-8法测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.通过Western blot和qRT-PCR分析Furin介导A
【机 构】
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广西医大开元埌东医院骨科,广西 南宁 530000
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目的 探讨富含血小板血浆(PRP)来源外泌体(PRP-Exo)对体外白介素1β(IL-1β)处理的软骨细胞的保护作用和分子机制.方法 分离和纯化PRP-Exo,并鉴定和表征.IL-1β处理大鼠软骨细胞模拟体外骨关节炎(OA)中的软骨细胞(IL-1β组),IL-1β联合使用PRP-Exo(IL-1β+PRP-Exo组)或活化模式的PRP(PRP-As)(IL-1β+PRP-As组)分别作用于细胞,CCK-8法测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.通过Western blot和qRT-PCR分析Furin介导ALK1/ALK5信号平衡的机制.结果 从PRP成功分离纯化了外泌体.IL-1β+PRP-As组和IL-1β+PRP-Exo组的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和细胞凋亡率低于IL-1β组,细胞增殖率和Furin的水平均高于IL-1β组(均P<0.05),且IL-1β+PRP-Exo组促进软骨细胞增殖及抑制凋亡作用都优于IL-1β+PRP-As组(均P<0.05).软骨细胞中加入Furin可明显降低ALK1/ALK5比率(P<0.05).IL-1β不仅降低软骨细胞中Furin水平,且提高ALK1/ALK5的比率(均P<0.05),而加入PRP-Exo可通过提高Furin水平从而降低ALK1/ALK5比率(均P<0.05).结论 PRP-Exo通过维持Furin介导的ALK1/ALK5平衡促进软骨细胞增殖并抑制凋亡.
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