用衔接头ＰＣＲ克隆新的胡萝卜Ⅱ型转化酶基因启动子

• 作 者: 王新国 张国华 等
• 机 构: 军事医学科学院生物工程研究所,中国科学院微生物研究所
• 出 处: 中国生物化学与分子生物学报
• 发表日期: 2001年1期
• 关键词: 衔接头PCR Ⅱ型转化酶 启动子 胡萝卜 糖代谢 adaptor|PCR invertaseⅡ promoter

为克隆新的胡萝卜Ⅱ型转化酶基因启动子，将胡萝卜基因ＤＮＡ分别PvuⅡ、EcoRⅤ、ＤraⅠ和ＳmaⅠ酶切，酶切片段与一特殊的衡接头连接，取连接产物作模板，以衔接头引物和基因特异引物做ＰＣＲ，得到的主要ＰＣＲ产物分别为３．４kb、1.3kb、0.4kb和0.6kb，交ＥcoRⅤ－衔接头体系的ＰＣＲ产物克隆和测序，并将其序列与ＧenBank中的已知序列进行比较分析，发现了一个新的胡萝卜Ⅱ型转化酶启动子序列，它含有类似于ＴＡＴＡbox和ＣＡＡＴbox的元件，在启动子的远上游区域还含有多个AT富含区，该启动子的发