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提出了反相高效液相色谱测定饲料添加剂及饲料中L-肉碱的方法。对样品提取方法和色谱分离条件做了试验并予以优化。以AgelaASBVS851505—0C8色谱柱（150mm×4．6mm，5μm）为分离柱，以甲醇和磷酸盐缓冲溶液以体积比5比95的混合溶液为流动相，在检测波长为210nm处进行测定。L-肉碱质量浓度与其峰面积在0．025-4．0mg·L^-1范围内呈线性关系。标准加入平均回收率在96．0％～101．2％之间，相对标准偏差（n=5）均小于3．0％。