【摘 要】
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目的 探讨耐受性树突状细胞(DC)的诱导及其机制. 方法 以20 ng/ml转化生长因子β1(TGF-β1)与C57BL/6小鼠来源的树突状细胞系(DC2.4)共培养6 d,诱导耐受性DC(TGFβ-DC);以脂
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目的 探讨耐受性树突状细胞(DC)的诱导及其机制. 方法 以20 ng/ml转化生长因子β1(TGF-β1)与C57BL/6小鼠来源的树突状细胞系(DC2.4)共培养6 d,诱导耐受性DC(TGFβ-DC);以脂多糖(LPS)刺激DC 48 h即为成熟DC(LPS-DC);以特异性针对免疫球蛋白样受体B(PIR-B)的小RNA干扰片段(PIR-B siRNA)转染TGF-DC(si-DC).应用半定量逆转录聚合酶链反应和流式细胞仪测定各细胞表面PIR-A/B共同的胞外段PIR的表达、PIR-A/B及其mRNA的表达,以Balb/c小鼠脾淋巴细胞为反应细胞进行混合淋巴细胞反应(MLR),观察各组DC刺激反应细胞增殖的能力,同时以酶联免疫吸附试验测定MLR上清液中γ干扰素(IFN-γ)的水平. 结果 TGFβ-DC的PIR-B mRNA表达明显上调,PIR-A mRNA的表达明显下调(P＜0.05),而LPS-DC的PIR-B mRNA表达明显下调,PIR-A mRNA表达明显上调(P＜0.05),二者表面PIR的表达均增加,但差异无统计学意义(P＞0.05);转染PIR-B siRNA后,TGFβ-DC的PIR-B mRNA表达明显下调,细胞表面的PIR表达也受到明显抑制(P＜0.05).正常DC2.4细胞可以刺激异基因淋巴细胞增殖;LPS-DC刺激异基因淋巴细胞增殖的能力明显增强,其反应体系中的IFN-γ水平明显升高;TGFβ-DC刺激淋巴细胞增殖的能力受到明显抑制,其反应体系中的IFN-γ水平明显下降;而转染PIR-B siRNA后,TGFβ-DC刺激淋巴细胞增殖的能力得到明显恢复,其反应体系中的IFN-γ水平明显回升. 结论 TGF-β1可诱导产生耐受性DC,其高度表达免疫抑制性受体PIR-B,上调PIR-B的表达可能是TGF-β1诱导产生耐受性DC的分子机制之一.
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