【摘 要】
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目的在原核表达系统中对肠道病毒71型（EV71）基因进行克隆、表达、纯化,建立血清IgM抗体的检测方法,用于EV71感染的早期诊断。方法检索EV71 VP1基因序列,设计合成引物,并在引物
【机 构】
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解放军302医院,沈阳沈阳市第六人民医院
【基金项目】
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军队“十一五”科技攻关项目（06G143）
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目的在原核表达系统中对肠道病毒71型（EV71）基因进行克隆、表达、纯化,建立血清IgM抗体的检测方法,用于EV71感染的早期诊断。方法检索EV71 VP1基因序列,设计合成引物,并在引物两端插入酶切位点,采用RT-PCR分离EV71 VP1全基因序列。PCR产物回收、纯化,插入T载体进行序列同源性测定。再插入表达质粒载体pRSET,构建pRSET-EV71重组质粒。利用纯化后的表达产物,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测EV71IgM抗体。共收集31例临床诊断为手足口病患儿及36例健康儿童的血清标本
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