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为了构建鸡传染性支气管炎病毒（IBV）核蛋白（N）单链抗体（scFv），本研究通过提取杂交瘤细胞株6H3的总mRNA，采用RT—PCR法扩增出抗IBVN蛋白抗体的重链和轻链可变区基因，利用重叠延伸PCR将其重链和轻链通过一条寡核苷酸链连接起来扩增了单链抗体基因，并将其克隆于原核表达载体pET-30a，构建重组质粒，转化Ecoli BL21（DE3），经IPTG诱导表达。对表达产物进行纯化复性后，用夹心ELISA和westernblot检测表明scFv可与传染性支气管炎病毒核蛋白发生特异性结合。