人Rab7基因的原核表达与多克隆抗体制备

来源 :泉州师范学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：uestchujun

【摘要】

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利用RT—PCR技术从HEK293细胞中克隆到人Rab7基因，通过双酶切将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中，转化大肠杆菌E．coliDH5α感受态细胞，获得阳性克隆．24℃下IPTG诱导表达，Glutathi—

【作者】

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昊冰艳肖惠吴文林

【机构】

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泉州师范学院化学与生命科学学院

【出处】

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泉州师范学院学报

【发表日期】

：

2014年2期

【关键词】

：

Rab7 原核表达抗体 Rab7 Prokaryoticexpression antibody

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（31072236）,福建省教育厅资助项目（JK2009043）

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利用RT—PCR技术从HEK293细胞中克隆到人Rab7基因，通过双酶切将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中，转化大肠杆菌E．coliDH5α感受态细胞，获得阳性克隆．24℃下IPTG诱导表达，Glutathi—one Sepharose 4B纯化后获得高纯度的Rab7蛋白．并以此为抗原免疫小白鼠，获得了Rab7的特异性抗体．

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