目的 进一步研究牛磺酸对肝星状细胞(HSC)增殖抑制作用的机制.方法用四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖;流式细胞仪测定细胞周期;免疫细胞化学和实时荧光定量PCR测定细胞周期调控蛋白Cyclin D1和P21waf1表达.结果牛磺酸对HSC增殖具有抑制作用,在浓度为5、10、20、30、40、50 mmol/L作用48 h时的抑制率分别为6.7%、14.4%、23.3%、32.2%、36.7%和45.6%,t值为2.939～6.369,P＜0.05～0.01.流式细胞仪检测发现牛磺酸可阻滞HSC由G0/G1期向S期转换,使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少.G0/G1期、S期细胞,牛磺酸浓度为40 mmol/L时,分别为(68.2±1.4)%和(26.2±1.3)%,与对照组分别为(56.2±1.7)%和(38.5±0.8)%,差异有统计学意义,t≥5.422,P＜0.01.牛磺酸可抑制Cyclin D1表达、促进P21 waf1表达,用免疫细胞化学染色结合数码图像分析系统软件分析发现牛磺酸浓度在40 mmol/L时HSC的Cyclin D1表达的平均吸光度为0.13±0.02,P21waf1为0.19±0.02,对照组分别为0.18±0.02和0.14±0.01,差异有统计学意义,t=6.689和t=6.528,P＜0.01.实时荧光定量PCR检测也发现经40 mmol/L牛磺酸处理的HSC的Cyclin D1 mRNA表达量(拷贝数与10 6磷酸甘油醛脱氢酶比值)降低为5776.7±3345.0,对照组为18 400.6±1374.8,而P21waf1 mRNA表达量(拷贝/10 6磷酸甘油醛脱氢酶)增多为44 866.7±3910.7,对照组为16 933.3±960.9.结论牛磺酸通过抑制Cyclin D1表达、促进P21waf1表达,使HSC阻滞于G0/G1期,而抑制HSC增殖。
牛磺酸通过调控细胞周期蛋白抑制肝星状细胞增殖
【摘 要】
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目的 进一步研究牛磺酸对肝星状细胞(HSC)增殖抑制作用的机制.方法用四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖;流式细胞仪测定细胞周期;免疫细胞化学和实时荧光定量PCR测定细胞周期调控蛋白Cyclin D1和P21waf1表达.结果牛磺酸对HSC增殖具有抑制作用,在浓度为5、10、20、30、40、50 mmol/L作用48 h时的抑制率分别为6.7%、14.4%、23.3%、32.2%、36.7%和45.6
【机 构】
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200003,上海,第二军医大学长征医院消化内科,200003,上海,第二军医大学长征医院消化内科,200003,上海,第二军医大学长征医院消化内科,200003,上海,第二军医大学长征医院消化内科,
【出 处】
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中华肝脏病杂志
【发表日期】
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2005年13期
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