【摘 要】
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目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(trichostatin A, TSA)抑制HL-60细胞端粒酶活性及亚单位hTERT的表达并诱导凋亡的机制.方法采用MTT法和倒置相差显微镜观察不同浓度
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院,干细胞研究和应用中心,湖北,武汉,430022;华中科技大学同济医学院附属协和医院,血液科,湖北,武汉,430022
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目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(trichostatin A, TSA)抑制HL-60细胞端粒酶活性及亚单位hTERT的表达并诱导凋亡的机制.方法采用MTT法和倒置相差显微镜观察不同浓度曲古菌素A对HL-60细胞的抑制作用,流式细胞仪检测600 nmol·L-1 TSA作用后的细胞凋亡情况,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性变化,RT-PCR分析端粒酶三个亚单位的mRNA表达情况.结果曲古菌素A对HL-60细胞的抑制作用具有时间和剂量依赖性,AnnexinV/PI双染色体法检测凋亡显示,600 nmol·L-1 TSA作用48h后,细胞凋亡率为42.6%.600 nmol·L-1曲古菌素A作用12、24和48 h后,端粒酶活性分别下降为1.95±0.25、 1.73±0.12和1.52±0.09.RT-PCR显示，端粒酶逆转录酶[HT]hTERT表达下降,而端粒酶RNA模板(hTR)和端粒酶相关蛋白(hTP1)表达无明显改变.结论曲古菌素A(trichostatin, TSA)抑制HL-60细胞端粒酶活性下降,并诱导凋亡,其机制可能与曲古菌素A下调hTERT转录水平有关.
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