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目的 为快速、高通量检测HBV"a"决定簇热点突变,制备基因芯片,并进行了初步应用.方法 应用HBV基因保守序列设计PCR扩增引物,针对"a"决定簇突变设计简并探针,制备了检测126A、126S、144A、145R、145E、144A+145R和144A+145E突变的基因芯片.通过对质粒参考品或样本进行测定,以评价芯片的特异性、灵敏度、重复性和检测劣势株的能力,并对45例乙型肝炎患者的血清样本同时应用基因芯片和PCR产物直接测序法进行检测比较.结果 所制备的基因芯片能特异性检测出质粒参考品,灵敏度为5×103拷贝/μl.同一样本检测10次,芯片内和芯片间变异系数均小于15%.当劣势株占HBV毒株10%以上时,基因芯片即可检出.芯片法测得45例样本中126A、126S-1和126S-2的阳性率(分别为46.67%、35.56%和24.44%)显著高于PCR产物直接测序法(分别为9.00%、4.44%和2.22%;P直分别为0.000、0.000和0.002),克隆测序验证了基因芯片法的特异性.结论 基因芯片法可快速、有效地检测HBV特定位点突变株,为HBV突变的大规模筛查提供了方法。