【摘 要】
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通过体外皮质酮诱导的HT22细胞损伤实验和慢性不可预见性应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)刺激小鼠建立CUMS模型实验,探讨黄藤总生物碱抗抑郁作用及作用机制.在
【机 构】
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吉林农业大学中药材学院,吉林长春130118;吉林农业大学中药材学院,吉林长春130118;教育部动物生产及产品质量安全重点实验室,吉林长春130118;吉林省梅花鹿高效养殖和产品开发技术工程研究中心
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通过体外皮质酮诱导的HT22细胞损伤实验和慢性不可预见性应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)刺激小鼠建立CUMS模型实验,探讨黄藤总生物碱抗抑郁作用及作用机制.在细胞水平实验中,采用皮质酮对HT22细胞进行损伤,利用CCK-8法检测细胞活力,Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡情况.整体动物水平实验,将C57BL/6N小鼠随机分为对照组、模型组、黄藤总生物碱低(100 mg·kg-1)、中(200 mg·kg-1)、高(400 mg·kg-1)剂量组及阳性药组,采用CUMS刺激21 d,建立CUMS模型.利用行为学评价和Morris水迷宫实验评价小鼠的抑郁行为,ELISA法检测血清中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)及去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)含量.利用Western blot法考察HT22细胞及小鼠海马内凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及cleaved caspase-3蛋白表达情况.结果 显示,黄藤总生物碱对皮质酮诱导的HT22细胞损伤具有改善作用,并呈剂量依赖性.Hoechst 33258染色实验中,与模型组相比,黄藤总生物碱组减少了蓝色亮点,改善了皮质酮造成的凋亡现象.动物实验结果表明,与模型组相比,黄藤总生物碱显著改善了小鼠的抑郁样行为,提高了血清中5-HT、DA及NE的含量.Western blot结果显示,与模型组比较,黄藤总生物碱显著提高了Bcl-2蛋白的表达,降低了Bax、cleaved caspase-3蛋白的表达.以上结果说明黄藤总生物碱具有显著的抗抑郁作用,其作用机制可能与调控凋亡相关蛋白或增加脑内单胺类神经递质的含量有关.
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