【摘 要】
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该研究探讨麦冬皂苷D对人源心肌细胞AC-16中主要脂肪酸代谢酶的影响,为麦冬的心血管保护机制和临床安全应用提供参考依据.利用CCK-8试剂(cell counting kit-8细胞计数试剂)检
【机 构】
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军事医学研究院辐射医学研究所,北京100850
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该研究探讨麦冬皂苷D对人源心肌细胞AC-16中主要脂肪酸代谢酶的影响,为麦冬的心血管保护机制和临床安全应用提供参考依据.利用CCK-8试剂(cell counting kit-8细胞计数试剂)检测不同浓度的麦冬皂苷D对心肌细胞的活力影响,同时在显微镜下观察不同浓度麦冬皂苷D对心肌细胞形态和数量的影响,并应用RT-PCR技术检测麦冬皂苷D对心肌细胞中脂肪酸代谢酶CYP2J2、CYP4F3、CYP4A11、CYP4A22、CYP4F2 mRNA表达的影响,Western blot法检测不同浓度麦冬皂苷D孵育下CYP4F3蛋白的表达水平.细胞活力检测结果表明,与对照组相比,低浓度的麦冬皂苷D对心肌细胞存活率没有影响,高于20 μmol· L-1的麦冬皂苷D能促进存活率.显微镜下观察到低于100 μmol· L-1的麦冬皂苷D对心肌细胞形态和数量均未产生明显影响.RT-PCR结果表明,与对照组相比,5μmol.L-1的麦冬皂苷D能引起CYP2J2和CYP4F3 mRNA的轻度上调,高浓度麦冬皂苷D(10、20 μmol· L-1)能显著诱导CYP2J2和CYP4F3 mRNA表达(P＜0.05),呈现剂量依赖性.同样浓度的麦冬皂苷D对CYP4A11、CYP4A22、CYP4F2 mRNA表达影响较小.Western blot结果表明,20 μmol· L-1的麦冬皂苷D能显著诱导CYP4F3的蛋白表达(P＜0.05),且呈现剂量依赖性.综合上述结果,低于100 μmol· L-1的麦冬皂苷D不会影响AC-16心肌细胞的活力,麦冬皂苷D能够选择性诱导CYP2J2和CYP4F3的表达,调控脂肪酸信号分子的代谢途径,从而起到保护心血管系统的作用.
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