【摘 要】
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目的 旨在克隆表达纯化GPS2蛋白,并制备抗血清用于研究GPS2的功能.方法 用RTPCR得到GPS2基因,并克隆到pET-28a原核表达载体,用Ni2+-NTA树脂纯化GPS2后,免疫兔得到抗血清.结果
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所
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目的 旨在克隆表达纯化GPS2蛋白,并制备抗血清用于研究GPS2的功能.方法 用RTPCR得到GPS2基因,并克隆到pET-28a原核表达载体,用Ni2+-NTA树脂纯化GPS2后,免疫兔得到抗血清.结果成功构建了pET-28a-GPS2原核表达质粒,并实现重组蛋白在大肠杆菌中的高效表达,Ni2+-NTA树脂亲和层析纯化了GPS2蛋白,经过透析复性后得到质量浓度约为300μg/ml的GPS2纯化蛋白；制备了GPS2蛋白的特异性多克隆抗血清,ELISA测定抗血清效价远远高于1:12 800,Western Blot表明该抗血清能够特异性识别结合GPS2蛋白.结论 GPS2在E.coli高效表达,其纯化产物可用于制备抗血清,用于GPS2的功能分析.
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