【摘 要】
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目的:构建TPT1真核表达载体,并转染肝癌细胞系SMMC-7721,为进一步研究奠定基础.方法:通过PCR的方法在TPT1 ORF(open reading frame,开放读码框)两侧添加 Eco RI和 Bam HI的识
【机 构】
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河南省人民医院肿瘤科,郑州大学消化疾病研究所
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目的:构建TPT1真核表达载体,并转染肝癌细胞系SMMC-7721,为进一步研究奠定基础.方法:通过PCR的方法在TPT1 ORF(open reading frame,开放读码框)两侧添加 Eco RI和 Bam HI的识别序列,将其定向插入真核报告表达载体pEGFP-N3中,构成pEGFP-N3TPT1重构体,卡那霉素筛选阳性克隆,碱裂解法抽提质粒,Sanger法测序,VecScreen和BLAST分析测序结果,lipofectAMINE转染肝癌细胞系SMMC-7721,荧光显微镜及RT-PCR方法检
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