【摘 要】
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目的 探讨一株抗肝癌干细胞单抗H C-7 B2的体、内外功能,为肝癌的靶向治疗提供候选单抗.方法 采用SDS-PAGE电泳法检测抗体纯度.采用无血清成球实验和侵袭实验分析体外HC-7B2
【机 构】
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国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院/分子肿瘤学国家重点实验室,北京 100021
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目的 探讨一株抗肝癌干细胞单抗H C-7 B2的体、内外功能,为肝癌的靶向治疗提供候选单抗.方法 采用SDS-PAGE电泳法检测抗体纯度.采用无血清成球实验和侵袭实验分析体外HC-7B2单抗对肝癌干细胞自我更新和侵袭的影响.采用CCK8法检测HC-7B2单抗联合顺铂对肝癌干细胞增殖能力的影响.裸鼠体内治疗实验研究单抗HC-7B2联合顺铂对肝癌移植瘤生长的抑制作用.结果 纯化单抗HC-7B2,鉴定纯度>90％.体外无血清成球实验结果显示,单抗HC-7B2处理组MHCC97-L sphere细胞成球数量为(69±17)个,阴性对照组为(115±20)个,高于抗体处理组,差异有统计学意义,t=26.56,P<0.01.侵袭实验结果显示,单抗HC-7B2处理组侵袭细胞数(72±19)低于阴性对照组(156±18),差异有统计学意义,t=69.34,P<0.001.CCK-8法结果显示,单抗HC-7B2联合顺铂较单用顺铂可抑制MHCC97-L sphere细胞生长,F=49.42,P<0.001;单独使用顺铂的半数抑制浓度(IC50)为0.77μg/L,而顺铂联合高、中、低剂量单抗HC-7B2的IC50分别为0.089、0.193和0.550μg/L.体内治疗实验研究结果显示,单抗HC-7B2(2.5 mg/kg)和HC-7B2(10 mg/kg)联合顺铂较单用顺铂组均可显著抑制移植瘤生长,抑制率分别为82.4％(t=7.401,P<0.05)和92.0％(t=8.690,P<0.001),而单用顺铂组的抑制率为53.0％,t=2.536,P<0.05.结论 抗肝癌干细胞单抗H C-7 B2体外能显著抑制肝癌干细胞的自我更新、侵袭能力以及增加顺铂敏感性,体内单抗联合顺铂显著抑制移植瘤的生长和延长小鼠存活期,为肝癌干细胞的靶向治疗提供有潜在应用价值的候选单抗药物.
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