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目的
探讨成视网膜细胞瘤结合蛋白4(retinoblastoma protein associated proteins 48, RBBP4)分子在HIV-1潜伏中的作用及其机制。
方法25 ng/ml的肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha, TNF-α)和10 ng/ml的IL-2刺激HIV-1潜伏细胞CEM-Bru后，利用染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation, ChIP)分别研究细胞刺激前后RBBP4以及与RBBP4关联的组蛋白脱乙酰化酶1和2(histone deacetylase, HDAC1/2)在前病毒启动子长末端重复序列(long terminal repeat, LTR)上的结合变化。电转法对潜伏细胞进行RBBP4部分干扰后，利用ChIP检测HDAC1/2以及组蛋白H3乙酰化水平和RNA聚合酶Ⅱ (RNA polymerase Ⅱ，RNA PolⅡ) 在LTR的结合变化，RT-PCR检测HIV-1起始转录本和延长转录本的变化。
结果在HIV-1潜伏细胞中RBBP4和HDAC1/2在LTR上结合与激活状态相比显著增加；将RBBP4部分干扰后，RBBP4在LTR上的结合明显减少，导致HDAC1和HDAC2在LTR上的结合也减少，并伴随着组蛋白3 (histone 3, H3)乙酰化水平的增加和RNA PolⅡ在LTR上结合的增加。此外，RBBP4干扰后HIV-1起始转录本明显增加。
结论RBBP4能促进HIV-1潜伏，这种作用可能与组蛋白脱乙酰化酶HDAC1和HDAC2有关。