CD24分子调节四氯化碳诱导小鼠肝纤维化的实验研究

• 作 者: 项杰 李雄飞 海蕾 樊亚童 郑鉴 张华 张学军
• 机 构: 300070 天津医科大学基础医学院免疫学系，天津市细胞和分子免疫重点实验室；天津医科大学免疫微环境与疾病省部共建教育部重点实验室,300070 天津医科大学基础医学院免疫学系，天津市细胞和分子免疫重
• 出 处: 中华微生物学和免疫学杂志
• 发表日期: 2017年37期
• 关键词: CD24分子 四氯化碳 肝纤维化 巨噬细胞 TGF-β1

目的

探究CD24分子对四氯化碳(carbon tetrachloride，CCl₄)诱导的小鼠肝纤维化发生的调节作用及其细胞学基础。

方法

建立CCl₄诱导的小鼠肝纤维化模型，HE染色观察小鼠肝组织损伤情况，血清学方法检测谷丙转氨酶(ALT)表达水平。Sirius Red染色法检测小鼠肝纤维化的程度，real-time PCR方法检测肝脏组织中α-SMA、Col1a1、TGF-β1及其CD24分子的表达。Western blot检测肝组织中α-SMA、CD24分子蛋白水平的表达。比较野生型(WT)小鼠和CD24基因敲除小鼠(CD24^－/－)注射CCl₄后，小鼠肝纤维化的程度。流式细胞术检测模型鼠肝内巨噬细胞的变化。ELISA方法检测M1、M2型巨噬细胞上清中TGF-β1的表达。

结果

在CCl₄诱导的小鼠肝纤维化模型中，肝组织中CD24 mRNA表达水平明显升高，同时，Western blot检测CD24分子也升高。HE染色观察到CD24^－/－小鼠肝中炎性细胞浸润明显多于WT小鼠，血清中ALT表达水平也明显升高。Sirius Red染色结果显示CD24^－/－小鼠肝组织中纤维化严重程度高于WT小鼠，α-SMA、Col1a1等肝纤维化指标都有明显升高。流式细胞术分析表明纤维化发生后，CD24^－/－小鼠的巨噬细胞明显多于WT小鼠。Real-time PCR检测发现CD24^－/－小鼠肝组织中TGF-β1 mRNA的表达明显高于WT小鼠。ELISA检测结果发现CD24^－/－的M2型巨噬细胞上清中，TGF-β1的分泌量多于WT的M2型巨噬细胞上清，而M1型巨噬细胞上清中无明显变化。

结论

CD24分子减轻了CCl₄诱导的小鼠肝纤维化，机制可能通过调节肝内M2型巨噬细胞分泌的促纤维化细胞因子TGF-β1，进而改变肝星状细胞(HSCs)的活性以减轻肝的纤维化。