论文部分内容阅读
【摘要】目的建立以高效液相色谱法测定十维铁咀嚼片中维生素A的含量的方法。方法iamonsilC18色谱柱，（150mm×4.6mm，5μm；流动相为乙腈：甲醇：水（70：18：12；柱温：30℃；流速：1.0mL·min-1；检测波长：265nm；进样量：20μl；并用维生素A醋酸酯对照品进行定量对照。结果维生素A检测浓度的线性范围为300-700μg·mL-1（r=0.9998；平均回收率为99.10%（RS=0.74%。结论本方法操作简便、快速、准确，可用于该制剂的质量控制。
【关键词】高效液相色谱法；维生素A；含量测定
doi：10.3969j.issn.1004-7484（x.2013.10.756文章编号：1004-7484（2013-10-6193-01
十维铁咀嚼片是用于4岁以上儿童、成人及老年人铁元素及维生素的补充。制剂中含有多种水溶性维生素和脂溶性维生素。国家药品标准[1]收载了该品种。把维生素A和维生素E在同一个色谱条件下进行了含量测定，基于本制剂成分复杂，不能完全有效的分离，本文采用HPLC法对十维铁咀嚼片中维生素A进行了单一研究，达到了与其他组成有效分离，提供了快速、简便、准确的测定方法。
1仪器与试药
1.1仪器岛津LC-10A高效液相色谱仪，岛津LC-10A泵，SP-10A紫外检测器；YL Clarity数据处理系统。
1.2试药维生素A醋酸酯对照品（中国药品生物制品检定所，批号：1716002；十维铁咀嚼片（每片含维生素A醋酸酯5mg，实验室自制；蛋白酶Alcalase（sigma公司批号：Lot#1001533V；甲醇、乙腈均为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱：iamonsilC18（150mm×4.6mm，5μm；流动相：乙腈：甲醇：水=70：18：12；柱温：30℃；流速：1.0ml·min-1；检测波长：265nm；进样量：20μl。
2.2溶液的制备
2.2.1对照品溶液的制备避光操作。精密称取维生素A醋酸酯对照品约125mg，至25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制备成5mg·min-1的一级储备液。取1ml一級储备液至10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。过膜。
2.2.2供试品溶液的制备避光操作。取样品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约含维生素A醋酸酯5mg，至10ml量瓶中，加蛋白酶Alcalase3滴，加少量水使粉末刚润湿，放置5min，加5ml甲醇超声溶解，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过膜。色谱详见图1。
2.3线性关系考察分别精密量取称取“2.2.1”项下一级储备溶液0.6、0.8、1、1.2、1.4mL，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度。按“2.1”项下色谱条件进样测定，以峰面积（A为纵坐标，浓度（C为横坐标进行回归分析，得回归方程为A=9035C-177816（r=0.9998。结果表明，维生素A检测浓度的线性范围为300-700μg·ml-1。
2.4精密度试验取“2.2.1”项下对照品溶液适量，按“2.1”项下色谱条件，连续进样6次，计算峰面积。结果，RS为0.68%。
2.5溶液稳定性试验取同一份供试品溶液分别于0、2、4、6、8、10h时，按“2.1”项下色谱条件进样，测定峰面积。结果，其相对标准偏差为1.12%，表明供试品溶液在10h内稳定。
2.6回收率试验称取本品，按“2.2.2”项下方法以供试品溶液浓度的80%、100%、120%分别配制3份溶液，共9份样品液，按“2.1”项下方法测定，计算维生素A回收率，见表1。
99.100.743讨论
本法在国家药品标准的基础上，加入乙腈，增强洗脱能力，改善分离效果及峰形。经过反复试验，乙腈、甲醇和水的比例为70：18：12时，分离效果最佳。
由于该制剂选用微囊化的维生素A醋酸酯原料药，直接用甲醇难以将其中的维生素A全部溶解出来，回收率及重现性均难以达到要求，因此在进行含量测定时，需在配制过程中加入蛋白酶，破坏囊壳，再用甲醇将维生素A醋酸酯溶解出来，该方法符合含量测定的要求，能够满足制剂质量控制的要求。
参考文献
[1]国家药品标准.十维铁咀嚼片WS1-（X-022-2006Z.
【关键词】高效液相色谱法；维生素A；含量测定
doi：10.3969j.issn.1004-7484（x.2013.10.756文章编号：1004-7484（2013-10-6193-01
十维铁咀嚼片是用于4岁以上儿童、成人及老年人铁元素及维生素的补充。制剂中含有多种水溶性维生素和脂溶性维生素。国家药品标准[1]收载了该品种。把维生素A和维生素E在同一个色谱条件下进行了含量测定，基于本制剂成分复杂，不能完全有效的分离，本文采用HPLC法对十维铁咀嚼片中维生素A进行了单一研究，达到了与其他组成有效分离，提供了快速、简便、准确的测定方法。
1仪器与试药
1.1仪器岛津LC-10A高效液相色谱仪，岛津LC-10A泵，SP-10A紫外检测器；YL Clarity数据处理系统。
1.2试药维生素A醋酸酯对照品（中国药品生物制品检定所，批号：1716002；十维铁咀嚼片（每片含维生素A醋酸酯5mg，实验室自制；蛋白酶Alcalase（sigma公司批号：Lot#1001533V；甲醇、乙腈均为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱：iamonsilC18（150mm×4.6mm，5μm；流动相：乙腈：甲醇：水=70：18：12；柱温：30℃；流速：1.0ml·min-1；检测波长：265nm；进样量：20μl。
2.2溶液的制备
2.2.1对照品溶液的制备避光操作。精密称取维生素A醋酸酯对照品约125mg，至25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制备成5mg·min-1的一级储备液。取1ml一級储备液至10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。过膜。
2.2.2供试品溶液的制备避光操作。取样品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约含维生素A醋酸酯5mg，至10ml量瓶中，加蛋白酶Alcalase3滴，加少量水使粉末刚润湿，放置5min，加5ml甲醇超声溶解，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，过膜。色谱详见图1。
2.3线性关系考察分别精密量取称取“2.2.1”项下一级储备溶液0.6、0.8、1、1.2、1.4mL，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度。按“2.1”项下色谱条件进样测定，以峰面积（A为纵坐标，浓度（C为横坐标进行回归分析，得回归方程为A=9035C-177816（r=0.9998。结果表明，维生素A检测浓度的线性范围为300-700μg·ml-1。
2.4精密度试验取“2.2.1”项下对照品溶液适量，按“2.1”项下色谱条件，连续进样6次，计算峰面积。结果，RS为0.68%。
2.5溶液稳定性试验取同一份供试品溶液分别于0、2、4、6、8、10h时，按“2.1”项下色谱条件进样，测定峰面积。结果，其相对标准偏差为1.12%，表明供试品溶液在10h内稳定。
2.6回收率试验称取本品，按“2.2.2”项下方法以供试品溶液浓度的80%、100%、120%分别配制3份溶液，共9份样品液，按“2.1”项下方法测定，计算维生素A回收率，见表1。
99.100.743讨论
本法在国家药品标准的基础上，加入乙腈，增强洗脱能力，改善分离效果及峰形。经过反复试验，乙腈、甲醇和水的比例为70：18：12时，分离效果最佳。
由于该制剂选用微囊化的维生素A醋酸酯原料药，直接用甲醇难以将其中的维生素A全部溶解出来，回收率及重现性均难以达到要求，因此在进行含量测定时，需在配制过程中加入蛋白酶，破坏囊壳，再用甲醇将维生素A醋酸酯溶解出来，该方法符合含量测定的要求，能够满足制剂质量控制的要求。
参考文献
[1]国家药品标准.十维铁咀嚼片WS1-（X-022-2006Z.