枯草芽胞杆菌DarA蛋白的鉴定及其原核表达

• 作 者: 于秀菊 孙铮 韩小涛 李钰钰 于淼 董常生
• 机 构: 山西农业大学动物医学学院,辽宁省疾病预防控制中心
• 出 处: 畜牧兽医学报
• 发表日期: 2021年5期
• 关键词: 羊驼 枯草芽胞杆菌 细菌素 分离纯化 原核表达
• 基金项目: 山西省青年科学基金项目(201801D221301),山西农业大学创新团队项目(CXTD201201)。

目前,我国全面禁止饲料中添加抗生素,寻找新型的抗生素替代物是当前研究的热点之一。本研究旨在分离枯草芽胞杆菌SXAU18所产具有抗菌活性的蛋白物质,并通过原核表达系统获得其具有抗菌活性的重组蛋白。试验选用硫酸铵沉淀、氯仿抽提、分子截留等蛋白提取技术,对枯草芽胞杆菌SXAU18产生的抗菌蛋白进行分离纯化;通过SDS-PAGE技术和牛津杯扩散法检测分离到的蛋白物质的抑菌活性;通过质谱、生物信息学技术分析预测目的蛋白的基因序列;利用大肠杆菌表达系统和AKTA蛋白纯化系统对目的蛋白进行表达和纯化;借助牛津杯扩散法鉴