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目的
探究锌指结构E-box结合蛋白1(ZEB1)对胃癌细胞AGS放射敏感性的影响并探究其可能的作用机制。
方法通过不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)X射线照射AGS细胞，蛋白质印迹法(Western blot)实验观测细胞中ZEB1的表达量；取对数生长期AGS细胞，将过表达ZEB1、ZEB1干扰表达质粒以及相应的对照质粒(pcDNA3.1)和阴性对照干扰质粒转染至AGS细胞中，分别记为过表达ZEB1组、沉默ZEB1组、对照组和阴性对照组，细胞克隆实验检测过表达和沉默ZEB1对AGS细胞存活率的影响；流式细胞术实验检测细胞的凋亡率；Western blot检测细胞损伤相关组蛋白H2A(H2AX)、磷酸化H2AX(γ-H2AX)以及毛细血管扩张突变基因(ATM)表达量。
结果ZEB1在AGS细胞中的表达对放射剂量具有依赖性(F＝58.57, P<0.05)；过表达ZEB1能够提高AGS细胞的存活，抑制γ－H2AX表达(t＝12.18, P<0.05)，并阻碍细胞的凋亡(t＝7.27, P<0.05)，并随时间上调ATM表达量(F＝165.70, P<0.05)；沉默ZEB1降低AGS细胞的存活，增加γ-H2AX表达(t＝12.88, P<0.05)和细胞的凋亡(t＝8.36, P<0.05)，随时间下调ATM表达量(F＝44.80, P<0.05)。
结论ZEB1通过上调ATM表达调控胃癌AGS细胞放射敏感性。