【摘 要】
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目的:设计并制备抗GPC3/CD3双特异性重链抗体(BiHcAb),分析其与双特异性T细胞衔接子(BiTE)在体内外抗肿瘤活性的差异。方法:通过全基因合成抗GPC3和抗CD3单域抗体(sdAb)序列,克隆至携带IgG4 Fc段的表达载体中,同时利用KIH技术形成稳定的双特异性重链抗体。2种质粒共转染HEK-293F细胞,悬浮摇瓶培养获得目的抗体。SDS-PAGE和考马斯亮蓝染色确定相对分子质量。通过流式细胞术检测与GPC3阳性肿瘤细胞和外周血单个核细胞(PBMC)的结合能力。通过共培养检测BiHcAb介导
【机 构】
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海军军医大学药学院生化药学教研室,上海市第四人民医院病理科,海军军医大学长海医院药剂科
【基金项目】
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上海市科学技术委员会自然科学基金(21ZR1477600).
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目的:设计并制备抗GPC3/CD3双特异性重链抗体(BiHcAb),分析其与双特异性T细胞衔接子(BiTE)在体内外抗肿瘤活性的差异。方法:通过全基因合成抗GPC3和抗CD3单域抗体(sdAb)序列,克隆至携带IgG4 Fc段的表达载体中,同时利用KIH技术形成稳定的双特异性重链抗体。2种质粒共转染HEK-293F细胞,悬浮摇瓶培养获得目的抗体。SDS-PAGE和考马斯亮蓝染色确定相对分子质量。通过流式细胞术检测与GPC3阳性肿瘤细胞和外周血单个核细胞(PBMC)的结合能力。通过共培养检测BiHcAb介导
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