【摘 要】
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目的:研究羧基化超顺磁性氧化铁纳米颗粒(SPIO)纳米粒子与anti-EMMPRIN单克隆抗体耦联的有效方法,考察不同pH条件下进行耦联反应的效率及anti-EMMPRIN-SPIO的粒径水平。方法:
【机 构】
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东南大学公共卫生学院,东南大学环境医学工程教育部重点实验室,东南大学江苏省生物材料与器件重点实验室,
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目的:研究羧基化超顺磁性氧化铁纳米颗粒(SPIO)纳米粒子与anti-EMMPRIN单克隆抗体耦联的有效方法,考察不同pH条件下进行耦联反应的效率及anti-EMMPRIN-SPIO的粒径水平。方法:用EDC/sulfo-NHS法将anti-EMMPRIN单克隆抗体耦联到羧基化SPIO纳米粒子表面,用动态光散射法检测所得anti-EMMPRIN-SPIO的粒径,并用Bradford法和SDS-PAGE法分析不同酰胺化pH条件下的耦联效率。结果:通过EDC/sulfo-NHS的作用,anti-EMMPRIN单克隆抗体有效地耦联到羧基化SPIO表面。pH7.8时酰胺化的anti-EMMPRIN-SPIO纳米粒子的粒径最小,为63.15 nm。pH6.8和pH7.3条件下酰胺化所得上清中的抗体含量较低,分别为1.943 2×10-4g/L和3.511 1×10-4g/L,SDS-PAGE凝胶图谱上可明显观察到pH6.8、pH7.3和pH7.8条件下所制备样品的谱带分别位于55 000和25 000。结论:EDC/sulfo-NHS法是anti-EMMPRIN单克隆抗体耦联于羧基化SPIO表面的有效方法。在pH6.8、pH7.3、pH7.8条件下酰胺化耦联效率较高,所制备的anti-EMMPRIN-SPIO粒径较小。pH值对EDC/sulfo-NHS介导的耦联反应的耦联效率及anti-EMMPRIN-SPIO的粒径有较大影响。
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