【摘 要】
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以野生大豆黄化幼苗为材料提取其细胞核DNA,经LMP包埋并用蛋白酶K裂解其中的核蛋白后,采用脉冲电泳回收2 Mb左右细胞核DNA。用HindⅢ对回收细胞核DNA进行部分酶切并用脉冲电
【机 构】
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吉林省农业科学院生物技术研究中心,长春工业大学化学与生命科学学院,
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以野生大豆黄化幼苗为材料提取其细胞核DNA,经LMP包埋并用蛋白酶K裂解其中的核蛋白后,采用脉冲电泳回收2 Mb左右细胞核DNA。用HindⅢ对回收细胞核DNA进行部分酶切并用脉冲电泳回收酶切后的DNA片段,经电洗脱、浓缩和透析后DNA溶液浓度可达10 ng.μL-1。连接转化检测结果表明:该DNA可用于后续野生大豆基因组可转化人工染色体(TAC)文库的构建和基因组分析。
The nuclear DNA was extracted from the wild soybean etiolated seedlings and the nuclear DNA was embedded in LMP and cleaved with protease K, then the nuclear DNA of about 2 Mb was recovered by pulse electrophoresis. The DNA fragments were recovered by HindIII and partially digested by pulse electrophoresis. The DNA fragments were electroeluted, concentrated and dialyzed to a concentration of 10 ng.μL-1. The results of the linkage transformation showed that the DNA can be used for the construction and genome analysis of the subsequent transformative artificial chromosome (TAC) library of the wild soybean genome.
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