空肠弯曲菌peb1A基因的克隆表达及免疫性鉴定

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目的:克隆空肠弯曲菌peblA基因,构建其原核表达载体;鉴定重组表达产物的免疫原性。方法:PCR扩增空肠弯曲菌peblA基因,构建pET-28a(+)-peblA表达载体。转化E coli BL21(DE3)后诱导表达,用SDS—PAGE鉴定表达产物。采用Ni—NTA亲和层析法收集表达的目的重组蛋白PEBl。采用CJ全菌抗体的Western blot鉴定rPEBl免疫反应性,双向免疫扩散试验鉴定rPEBl免疫家兔的抗血清效价。结果:所克隆的基因与报道的核苷酸序列同源性为99.9%,转化E coli BL2
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