【摘 要】
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以筛选出的一株具有不对称拆分消旋酮基布洛芬氯乙酯的菌株NK13为材料,经初步鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),通过构建其基因文库,从中筛选得到一阳性克隆重组子pUC—NK
【基金项目】
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天津市自然科学基金资助项目(05YHMJC01100)
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以筛选出的一株具有不对称拆分消旋酮基布洛芬氯乙酯的菌株NK13为材料,经初步鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),通过构建其基因文库,从中筛选得到一阳性克隆重组子pUC—NK。测序分析表明,该重组子质粒中包含一长度为933bp的酯酶基因的完整开放阅读框,核苷酸同源性对比证明该酯酶基因属首次发现(GenBank登录号为DQl96347),将此基因克隆到原核表达载体pET21b^+ 中构建重组表达质粒pET—NKest,转化E.coli BL21,经IPTG诱导在宿主菌中得到表达,经S
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