新型神经保护肽[Gly14]-Humanin的表达,纯化和活性鉴定

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Humanin(HN)是近年来在人体内发现的内源性多肽,能够保护神经细胞免于各种阿尔茨海默氏病相关因素诱导的凋亡,HN肽链第14位氨基酸被Gly取代的突变体[Gly14]-Humanin(HNG),神经保护活性比HN高了近1000倍。但由于HNG天然获取的途径有限,限制了对其功能的进一步研究。构建了HNG的表达质粒pET32a/HNG,并将其转化大肠杆菌BL21 trxB(DE3),诱导表达后HNG以可溶性融合蛋白的形式出现并用镍离子亲和层析纯化,纯化的融合蛋白用肠激酶切割后经反相层析得到纯化的HNG多肽
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