【摘 要】
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目的 通过Langendorff系统构建离体大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤模型,探讨人参皂苷Rb1对心肌I/R损伤的保护作用及机制.方法 选取健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为假手术组、
【机 构】
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昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系,昆明,650500;昆明医科大学第二附属医院心内科,昆明,650101;昆明医科大学生物医学工程研究中心,昆明,650500
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目的 通过Langendorff系统构建离体大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤模型,探讨人参皂苷Rb1对心肌I/R损伤的保护作用及机制.方法 选取健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为假手术组、I/R组和人参皂苷Rb1(1、5、10和20 μmol/L)预处理组,每组10只.大鼠开胸、结扎主动脉后,取出心脏置于Langendorff系统进行灌流,按照分组情况构建相应模型.采用Lab Chart电生理系统检测心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左室压上升/下降最大速率(±dp/dtmax)等相关心功能指标;采用TTC染色法检测心肌梗死面积;采用Western blotting检测Beclin 1、LC3、p62和Lamp 2表达情况;采用免疫组织化学法检测Beclin 1表达情况.结果 人参皂苷Rb1(1、5、10和20 μmol/L)改善由I/R损伤导致的LVDP和±dp/dtmax的下降,减少心肌梗死面积,其中10 μmol/L浓度人参皂苷Rb1对心功能保护作用最显著(P＜0.05).Beclin 1在I/R组心肌细胞胞质中阳性表达率显著增高,加入人参皂苷Rb1 (10 μmol/L)后表达量减少(P＜0.05).与sham组相比,在I/R组发现自噬流受损:自噬相关蛋白Beclin 1、LC3和p62表达水平升高,Lamp 2表达水平下调(P＜0.05).加入人参皂苷Rb1(10 μmol/L)后上述蛋白的调控作用被反转,自噬流通畅(P＜0.05).结论 人参皂苷Rb1预处理通过改善自噬流受损发挥抗大鼠离体心肌I/R损伤的保护作用,其中以10 μmol/L浓度的人参皂苷Rb1保护作用最好.
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