高原鼠兔HIF-1α基因真核表达载体的构建及细胞表达和定位

• 作 者: 李红阁 赵新全 常智杰 任永明 王德鹏
• 机 构: 中国科学院西北高原生物研究所,中国科学院研究生院,清华大学医学院生物科学与技术系
• 出 处: 安徽农业科学
• 发表日期: 2009年10期
• 关键词: 高原鼠兔 HIF-1Α基因 真核表达载体 Plateau pika HIF-1α gene Eukaryotic expression vector
• 基金项目: 国家基础研究规划项目（2005CB422005）.

利用PCR从克隆质粒PMD18-T-pHIF-1α中扩增鼠兔HIF-1α;构建重组质粒pcDNA3.0/6Xmyc-p HIF-1α,用重组质粒转染HEK-293T,HeLa和COS-7细胞,通过免疫印迹分析,检测HIF-1α表达蛋白在细胞中的分布。EcoRI和XhoⅠ酶切鉴定和序列分析表明,构建的pcDNA3.0/6Xmyc-pHIF-1α真核表达载体序列正确;HIF-1α在真核细胞中能够正确表达,且其表达产物主要存在于细胞核中。